Perbezaan Utama – RPMI lwn DMEM
Kebanyakan kajian penyelidikan melibatkan pengkulturan sel haiwan dan oleh itu, kajian ini memerlukan penyelenggaraan garisan sel haiwan di bawah keadaan pertumbuhan khas. Pengkulturan sel haiwan dilakukan secara meluas dalam kajian farmakologi untuk mengenal pasti metabolisme ubat, dalam diagnostik penyakit dan dalam penyelidikan kanser. Media kultur sel merupakan aspek penting dalam kultur sel haiwan. Medium Helang Modified Dulbecco (DMEM) dan Medium Institut Memorial Roswell Park (RPMI) ialah dua media kultur yang digunakan dalam pengkulturan sel haiwan. RPMI ialah media yang digunakan secara meluas untuk mengkultur sel mamalia dalam kultur ampaian. DMEM ialah sejenis medium basal yang diubah suai, dengan peningkatan asid amino dan kepekatan vitamin sehingga empat kali ganda. DMEM digunakan dalam pengkulturan sel dalam budaya yang melekat. Perbezaan utama antara kedua-dua media ialah jenis budaya media. RPMI digunakan pada kultur ampaian, manakala DMEM digunakan untuk menkultur sel yang melekat.
Apakah itu RPMI?
RPMI atau Roswell Park Memorial Institute Medium juga dirujuk sebagai RPMI 1640. Nama media itu diperolehi oleh institut di mana media ditemui. Media ini biasa digunakan dalam kultur sel haiwan, terutamanya untuk pertumbuhan sel mamalia. Mereka pada asalnya dibangunkan untuk mengembangkan limfosit manusia.
Ramuan berikut disertakan dalam RPMI.
- Glukosa
- penunjuk pH (merah fenol)\
- Garam (natrium klorida, natrium bikarbonat, disodium fosfat, kalium klorida, magnesium sulfat dan kalsium nitrat)
- Asid amino
- Vitamin (i-inositol, kolin klorida, asid para-aminobenzoik, asid folik, nikotinamida, piridoksin hidroklorida, tiamin hidroklorida, kalsium pantotenat, biotin dan riboflavin, sianocobalamin)
Ciri istimewa RPMI ialah peningkatan kepekatan fosfat dalam medium. RPMI digunakan dalam atmosfera Karbon dioksida 5%. Ini akan memberikan keadaan maksimum dan optimum untuk pertumbuhan sel. pH media dikekalkan pada 8.0 oleh sistem penimbal bikarbonat.
Rajah 01: Kultur Sel pada Cawan Petri
Aplikasi RPMI dalam Pembudayaan Sel
- Penanaman limfosit T dan B manusia, Sel sumsum tulang dan hibridoma.
- Digunakan untuk mengkaji sel neoplastik manusia.
Apakah itu DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) ialah medium diubah suai yang disediakan secara komersial. Tekstur asal serbuk sederhana berwarna kuning. Dalam DMEM, kepekatan vitamin meningkat sehingga empat kali ganda dengan itu meningkatkan kandungan nutrien dalam medium.
DMEM juga diubah suai dengan menambahkan lebih banyak garam seperti ferik nitrat, natrium piruvat dan beberapa asid amino bukan penting seperti serin dan glisin. Formulasi glukosa dalam media juga diubah. Formulasi asal terdiri daripada 1000 mg/L glukosa, manakala dalam DMEM, kepekatan meningkat sehingga 4500 mg/L. DMEM juga memerlukan tambahan medium serum kerana ia bukan medium yang lengkap. Selalunya, DMEM ditambah dengan Fetal Bovine Serum (FBS). FBS menyediakan protein dan faktor pertumbuhan yang diperlukan untuk proses pengkulturan.
Ph medium berbeza-beza apabila penambahan Natrium Bikarbonat. pH medium sebelum penambahan Natrium Bikarbonat adalah sekitar 6.80 – 7.40, manakala pH selepas penambahan Natrium Bikarbonat terletak pada julat 7.60 – 8.20. Suhu penyimpanan medium ialah 2 – 8 0C.
Rajah 02: DMEM
Aplikasi DMEM
- Untuk mengkaji keupayaan poliomavirus membentuk plak dalam sel embrio tetikus.
- Dalam kajian perencatan sentuhan.
- Dalam penyelidikan dan analisis kultur sel ayam.
Apakah Persamaan Antara RPMI dan DMEM?
- RPMI dan DMEM digunakan dalam kultur sel haiwan.
- Kedua-dua media RPMI dan DMEM ialah rumusan cecair.
- Kedua-dua media RPMI dan DMEM mengandungi asid amino penting, vitamin dan garam tak organik yang diperlukan untuk pertumbuhan.
- Kedua-dua media RPMI dan DMEM tidak lengkap. Oleh itu, serum perlu ditambah.
- Kedua-dua media RPMI dan DMEM menggunakan glukosa sebagai sumber karbonnya.
- Kedua-dua media RPMI dan DMEM mempunyai pH yang lebih tinggi.
Apakah Perbezaan Antara RPMI dan DMEM?
RPMI lwn DMEM |
|
| RPMI ialah medium yang digunakan secara meluas untuk mengkultur sel mamalia dalam kultur ampaian. | DMEM ialah sejenis medium basal yang diubah suai dengan peningkatan asid amino dan kepekatan vitamin. |
| Kehadiran Fosfat Tambahan | |
| Dipersembahkan dalam RPMI. | Tidak hadir dalam DMEM. |
| Gunakan | |
|
Digunakan untuk menkultur sel dalam kultur yang melekat. Sudah biasa,
|
| Jenis Budaya | |
| RPMI digunakan untuk budaya penggantungan. | DMEM digunakan untuk kultur dengan sel melekat. |
Ringkasan – RPMI lwn DMEM
Kedua-dua RPMI dan DMEM digunakan secara meluas dalam pengkulturan sel haiwan terutamanya untuk menkultur garisan sel haiwan termasuk limfosit secara in vitro. DMEM ialah medium basal yang diubah suai di mana terdapat peningkatan kepekatan nutrien. RPMI dibangunkan oleh Roswell Park Memorial Institute, dan ia juga merupakan medium yang digunakan dalam pengkulturan sel haiwan terutamanya untuk limfosit mamalia. Kedua-dua media boleh didapati secara komersial. Ini ialah perbezaan antara RPMI dan DMEM.
