Perbezaan utama antara ELISA kompetitif dan tidak kompetitif ialah ELISA kompetitif menggunakan antigen perencatan manakala ELISA tidak kompetitif tidak menggunakan antigen perencatan untuk ujian.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ialah ujian imunologi yang mengesan pelbagai sasaran seperti antibodi, antigen, protein dan glikoprotein. Ia adalah kaedah yang cepat dan mudah untuk dilakukan. Oleh itu, ia lebih kerap digunakan untuk tujuan penyelidikan dan diagnostik. ELISA melibatkan penggunaan enzim dan pengikatan spesifik antibodi dan antigen. Berdasarkan bagaimana tindak balas berlaku, terdapat empat jenis ELISA: ELISA langsung, ELISA tidak langsung, ELISA sandwic, dan ELISA perencatan. ELISA langsung, tidak langsung dan sandwic ialah jenis ELISA tidak kompetitif manakala ELISA perencatan ialah jenis ELISA lengkap. Matlamat utama artikel ini adalah untuk membincangkan perbezaan antara ELISA kompetitif dan bukan kompetitif.
Apakah ELISA Kompetitif?
ELISA yang kompetitif mengukur kepekatan antigen dalam sampel melalui pengesanan gangguan isyarat. Di sini, ujian menggunakan antigen perencat. Oleh itu, ia adalah sejenis perencatan ELISA. Semasa prosedur ini, antigen yang terdapat dalam sampel bersaing dengan antigen rujukan yang dipilih untuk mengikat kepada jumlah antibodi berlabel tertentu. Tambahan pula, prosedur ini dimulakan dengan pengeraman sampel, dengan lebihan jumlah antibodi berlabel. Juga, antigen rujukan hendaklah disalut terlebih dahulu pada plat ujian telaga berbilang. Kemudian campuran sampel hendaklah ditambah ke plat ujian yang mengandungi antigen rujukan. Antibodi bebas akan mengikat antigen rujukan bergantung kepada jumlah antigen dalam sampel. Oleh itu, jika lebih banyak sampel antigen hadir, kurang antigen rujukan akan dikesan. Oleh itu, ia menghasilkan isyarat yang lebih lemah.
Rajah 01: ELISA
Sebaliknya, apabila sampel mengandungi kurang jumlah antigen, semakin banyak antigen rujukan akan menduduki antibodi dan memberikan isyarat yang kuat. Memandangkan ELISA kompetitif memberikan isyarat yang lebih kuat apabila sampel mengandungi jumlah antigen yang rendah, ELISA kompetitif ialah ujian yang sangat sensitif, walaupun untuk sampel dengan bilangan antigen yang kecil.
Dalam beberapa kit ELISA yang kompetitif, antigen berlabel digunakan dan bukannya antibodi berlabel. Di sini, antigen berlabel dan antigen sampel akan bersaing untuk mengikat antibodi utama. Begitu juga, apabila jumlah antigen dalam sampel adalah rendah, jumlah antigen berlabel yang mengikat antibodi akan lebih tinggi dan mencipta isyarat yang lebih kuat.
Apakah itu ELISA Tidak Bersaing?
Di antara empat jenis ELISA, tiga jenis adalah ELISA tidak kompetitif. Ia adalah ELISA langsung, ELISA tidak langsung dan ELISA sandwic. Ketiga-tiga format berfungsi di bawah prinsip biasa ELISA dengan sedikit perbezaan dalam metodologinya.
Direct ELISA menggunakan enzim berlabel antibodi primer. Oleh itu, ia tidak memerlukan antibodi sekunder. Oleh itu, ELISA langsung adalah lebih pantas daripada jenis ELISA yang lain. Antibodi utama akan terus mengikat antigen sasaran yang tidak bergerak yang terdapat dalam plat. Oleh itu, tindak balas enzim-substrat akan berlaku, menghasilkan isyarat yang boleh dilihat.
Rajah 02: Sandwic ELISA
Tidak seperti ELISA langsung, ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer tidak berlabel dan antibodi sekunder berlabel enzim. Sebaik sahaja antibodi primer mengikat antigen yang tidak bergerak, antibodi sekunder mengikat antibodi primer. Enzim dalam antibodi sekunder akan bertindak balas dengan antigen dan menghasilkan isyarat yang boleh dilihat. Sandwic ELISA berbeza dengan ELISA langsung dan tidak langsung. Di sini, antibodi tidak bergerak ke dinding plat ujian.
Apakah Persamaan Antara ELISA Kompetitif dan Bukan Kompetitif?
- ELISA kompetitif dan tidak kompetitif ialah dua jenis teknik ujian imunosorben.
- Ia adalah teknik yang sangat fleksibel dan sensitif.
- Tambahan pula, kedua-dua ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif ialah immunoassay berkaitan enzim.
- Selain itu, kedua-dua kaedah menjana isyarat akibat tindak balas enzim-substrat.
Apakah Perbezaan Antara ELISA Kompetitif dan Bukan Kompetitif?
ELISA Kompetitif ialah sejenis ELISA yang bergantung pada penyiapan antara antigen analit dan antigen berlabel untuk jumlah antibodi tertentu yang terhad. Sebaliknya, tiada persaingan sedemikian wujud antara antigen kepentingan dan antigen rujukan dalam ELISA tidak kompetitif. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. Begitu juga, ELISA kompetitif ialah ELISA perencatan manakala ELISA bukan kompetitif bukanlah ELISA perencatan. Jadi, ini juga merupakan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.
Selain itu, ELISA yang kompetitif adalah lebih sesuai untuk mengukur jumlah antigen yang menarik. Ia adalah kaedah yang sensitif. Sebaliknya, ELISA tidak kompetitif tidak bergantung pada bilangan antigen yang terdapat dalam sampel. Oleh itu, ini juga merupakan perbezaan antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif.
Di bawah maklumat grafik menerangkan perbezaan antara ELISA kompetitif dan tidak kompetitif secara perbandingan.
Ringkasan – ELISA Kompetitif vs Bukan Kompetitif
ELISA kompetitif dan tidak kompetitif ialah dua jenis utama ELISA atau ujian imunosorben berkaitan enzim. Dalam meringkaskan perbezaan antara ELISA kompetitif dan tidak kompetitif, ELISA kompetitif bergantung pada persaingan antara antigen kepentingan dan antigen rujukan terhadap jumlah antibodi yang terhad. Oleh itu, ELISA kompetitif juga dinamakan sebagai ELISA perencatan. Sebaliknya, ELISA tidak berdaya saing tidak bergantung pada persaingan antara antigen sasaran dan antigen rujukan. Ia menggunakan lebihan antibodi khusus berlabel ke arah analit yang diminati. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara ELISA yang kompetitif dan tidak kompetitif. ELISA langsung, ELISA tidak langsung dan ELISA sandwic ialah tiga jenis utama ELISA tidak kompetitif.
