Perbezaan utama antara GFP dan EGFP ialah GFP ialah protein jenis liar yang digabungkan dalam pengklonan molekul sel bukan mamalia manakala EGFP ialah jenis GFP yang dipertingkatkan atau direka bentuk yang boleh digunakan pada sel mamalia.
Pengklonan molekul ialah teknik termaju yang banyak digunakan saintis dalam mengekspresikan protein melalui teknologi rekombinan. Dalam teknologi DNA rekombinan, adalah perlu untuk mengubah vektor rekombinan dengan jayanya kepada organisma hos. Oleh itu, semasa proses transformasi, ia harus dikenal pasti dan disahkan sama ada gen yang diminati telah diubah atau tidak kepada hos. Untuk menilai ini, ahli biologi molekul menggunakan beberapa teknik. Daripada teknik tersebut, satu adalah gen wartawan. Gen wartawan ini bertindak sebagai penanda yang boleh dipilih untuk memilih transforman yang betul. Oleh itu, Green Fluorescent Protein (GFP) dan Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) ialah dua protein reporter yang digunakan dalam pengklonan molekul.
Apakah itu GFP?
GFP ialah protein jenis liar yang mengandungi 238 sisa asid amino dan beberapa kawasan urutan asid amino yang boleh dipilih yang membezakannya daripada protein pendarfluor yang lain. Tambahan pula, protein jenis liar ini pada asalnya diasingkan daripada Aequorea Victoria; sejenis obor-obor. Walau bagaimanapun, dalam fenomena semula jadi, obor-obor dapat menghasilkan pendarfluor warna hijau sebagai tindak balas kepada rangsangan tertentu.
Terdahulu, konsep ini mengejutkan saintis, dan mereka memutuskan untuk menggunakannya pada teknologi DNA rekombinan mereka. Akibatnya, saintis menggunakan bentuk mutan gen jenis liar ini sebagai gen wartawan dalam kajian ekspresi gen mereka. Gen jenis liar GFP mampu menghasilkan protein yang memberikan pendarfluor pada suhu bilik atau di bawah cahaya UV. Oleh itu, apabila dimasukkan ke dalam transforman, ia menyatakan dan menghasilkan pendarfluor. Jika hasil pendarfluor selepas proses transformasi, ia mengesahkan kejayaan proses transformasi. Secara ringkasnya, pelepasan pendarfluor menandakan kejayaan transformasi vektor yang membawa gen yang diminati ke dalam hos.
Rajah 01: GFP
Disebabkan sebab ini, GFP bertindak sebagai penanda in vivo ekspresi gen. Pada masa ini, teknik kejuruteraan genetik digunakan untuk menghasilkan GFP. Selain itu, banyak versi GFP yang dipertingkatkan seperti EGFP tersedia. Oleh itu, ini membolehkan penggunaan GFP yang cekap dalam pengklonan molekul dan kajian ekspresi gen.
Apakah itu EGFP?
Enhanced Green Fluorescent Protein atau EGFP ialah versi GFP yang dipertingkatkan. Dengan kata mudah, kita boleh mentakrifkan EGFP sebagai versi kejuruteraan GFP jenis liar. Apabila gen jenis liar GFP bermutasi, ia menghasilkan kesan yang bermanfaat. Oleh itu, gen GFP yang bermutasi membenarkan ekspresi aksara baharu, dan akibat daripada itu, kami boleh menghasilkan GFP Dipertingkat dengan ciri yang dipertingkatkan. Tambahan pula, kita boleh memperkenalkan mutasi dengan jayanya kepada gen GFP jenis liar menggunakan kaedah penyinaran atau kimia. Gen bermutasi ini kemudiannya menghasilkan EGFP, yang mempunyai ciri yang lebih bermanfaat.
Rajah 02: EGFP
Ciri EGFP yang dipertingkatkan adalah seperti berikut;
- Dapat memancarkan isyarat pendarfluor yang lebih kuat.
- Mempunyai kepekaan yang tinggi.
- Boleh menggunakannya pada sel mamalia dan bukannya prokariot dan eukariota peringkat rendah yang lain.
- Selain itu, memberikan peningkatan ketulenan produk.
Oleh itu, berbanding dengan GFP, EGFP ialah pilihan pilihan untuk kajian ekspresi gen. Walau bagaimanapun, produk ini lebih mahal berbanding GFP.
Apakah Persamaan Antara GFP dan EGFP?
- GFP dan EGFP ialah dua protein yang mempunyai keupayaan untuk mengeluarkan warna hijau
- Oleh itu, kedua-duanya berfungsi sebagai protein pelapor dalam kajian ekspresi gen.
- Selain itu, adalah mungkin untuk mensintesis kedua-duanya menggunakan teknologi DNA rekombinan.
- Selain itu, mudah untuk memutasi kedua-dua jenis ini untuk mensintesis bentuk yang dipertingkatkan.
Apakah Perbezaan Antara GFP dan EGFP?
Gen reporter ialah gen yang melekat dengan gen yang diminati dalam teknologi DNA rekombinan. Ia menandakan kejayaan transformasi vektor rekombinan kepada hos. Di sini, GFP dan EGFP ialah dua jenis protein pendarfluor hijau yang berfungsi sebagai protein wartawan. Walau bagaimanapun, perbezaan utama antara GFP dan EGFP ialah GFP adalah jenis liar manakala EGFP ialah versi kejuruteraan GFP. Tambahan pula, EGFP mempunyai ciri yang lebih berfaedah berbanding GFP. Contohnya, EGFP menghasilkan cahaya pendarfluor yang lebih kuat dan lebih sensitif daripada GFP. Satu lagi perbezaan antara GFP dan EGFP ialah sistem di mana kita boleh menggunakannya. Sistem bukan mamalia menggunakan GFP manakala sistem mamalia menggunakan EGFP.
Maklumat di bawah menunjukkan perbezaan antara GFP dan EGFP dalam bentuk jadual.
Ringkasan – GFP lwn EGFP
GFP dan EGFP ialah protein pelapor dalam pengklonan molekul dan kajian ekspresi gen. GFP ialah protein jenis liar, iaitu protein pendarfluor hijau. Protein itu pada mulanya diasingkan daripada obor-obor Aequorea victoria. Sebaliknya, EFGP ialah bentuk protein GFP yang dipertingkatkan. Ia adalah mutan jenis liar dengan ciri-ciri yang dipertingkatkan. Oleh itu, EFGP mempunyai kekuatan isyarat yang lebih tinggi dan sensitiviti yang lebih tinggi. Oleh itu, kita boleh menggunakannya pada vektor mamalia. Sebaliknya, penggunaan GFP terutamanya hanya pada vektor bukan mamalia. Secara keseluruhan, ini ialah perbezaan antara GFP dan EGFP.
