Perbezaan Utama – Transforman vs Rekombinan
Penggabungan semula dan transformasi ialah dua langkah penting dalam kejuruteraan genetik, di mana ciri-ciri organisma sengaja diubah suai dengan memanipulasi bahan genetiknya. Penggabungan semula ialah proses di mana DNA asing dimasukkan ke dalam genom vektor dan molekul DNA rekombinan terbentuk. Transformasi ialah langkah seterusnya di mana molekul rekombinan dimasukkan ke dalam organisma perumah. Sel perumah atau organisma memudahkan ekspresi molekul rekombinan. Perbezaan utama antara transforman dan rekombinan ialah transforman ialah sel atau organisma yang mengambil molekul rekombinan di dalam dan memudahkan ekspresi manakala rekombinan ialah vektor yang membenarkan penyisipan DNA asing ke dalam genomnya dan mengangkut ke dalam transforman perumah untuk ekspresi.
Apakah Transformants?
Transforman ialah sel atau organisma di mana DNA rekombinan diambil untuk ekspresi. Bakteria biasanya digunakan sebagai organisma perumah dalam kejuruteraan genetik kerana ia mudah tumbuh, membiak dan dikendalikan dalam keadaan makmal dan proses transformasi adalah mudah berbanding dengan organisma lain. Bakteria perumah yang paling popular digunakan dalam kejuruteraan genetik ialah bakteria E coli.
Semasa proses transformasi, sel perumah didorong untuk mengambil rekombinan. Walau bagaimanapun, sesetengah sel perumah tidak mengambil molekul rekombinan. Ia dikenali sebagai nontransformants dan sel yang mengandungi molekul DNA rekombinan di dalamnya dikenali sebagai transforman. Pemilihan transforman daripada bukan transforman dilakukan menggunakan penanda boleh dipilih dalam biologi molekul. Penanda boleh dipilih dimasukkan ke dalam genom vektor bersama-sama dengan sisipan DNA. Penanda boleh pilih yang biasa digunakan ialah gen tahan antibiotik. Gen penanda memudahkan pembezaan transforman dan meneruskan proses. Selepas proses transformasi, bakteria tumbuh dalam medium yang mengandungi antibiotik. Hanya transforman yang mampu berkembang pada medium itu kerana mereka memiliki rekombinan di dalam.
Setelah molekul DNA rekombinan diubah di dalam organisma perumah, DNA asing boleh sama ada disepadukan ke dalam genom sel perumah atau kekal tidak berintegrasi dalam sitoplasma. Walau bagaimanapun, ekspresi dan replikasi DNA asing berlaku dalam organisma perumah dan menghasilkan hasil yang diingini daripada proses tersebut.
Apakah Rekombinan?
Rekombinan ialah organisma atau sel yang mempunyai genom gabungan semula yang mengandungi DNA asing. Rekombinan adalah hasil daripada proses kejuruteraan genetik. Mereka dibina secara buatan secara in vitro dengan memasukkan gen yang diminati dan mengubah suai genom. Selalunya plasmid bakteria dan bacteriophages bertindak sebagai rekombinan dalam kejuruteraan genetik. Ia mempunyai chimera DNA yang berbeza. Molekul DNA rekombinan membawa DNA asing ke organisma perumah dan menjadikannya mengekspresikan serta membentuk produk yang diingini.
Molekul rekombinan dibina menggunakan endonuklease sekatan dan ligase DNA. Serpihan DNA yang dikehendaki dipisahkan daripada organisma asal dan dimasukkan ke dalam vektor untuk membuat rekombinan untuk transformasi. Pemotongan gen yang diminati dan pembukaan organisma vektor harus dilakukan dengan menggunakan enzim sekatan yang sama untuk mencipta hujung melekit yang serasi untuk bergabung bersama mereka. Sebaik sahaja DNA asing dimasukkan ke dalam genom vektor, ia dikenali sebagai rekombinan atau molekul DNA rekombinan.
Rajah 02: DNA Rekombinan
Apakah perbezaan antara Transformants dan Rekombinan?
Transformants lwn Recombinants |
|
| Transforman ialah sel yang mempunyai molekul DNA rekombinan di dalamnya. | Rekombinan ialah molekul pembawa yang mempunyai DNA asing yang dimasukkan ke dalam genom sendiri. |
| Ekspresi DNA Asing | |
| Ia adalah sel perumah yang mampu mengekspresikan DNA rekombinan. | Mereka seharusnya dapat mereplikasi sendiri dalam organisma hos. |
| Pilihan | |
| Sel yang mudah berkembang dan membiak dipilih sebagai sel hos. | Ia mestilah mudah diekstrak dan harus mengandungi penanda yang boleh dipilih. |
Ringkasan – Transformants vs Recombinants
Transforman ialah sel atau organisma dengan molekul DNA rekombinan di dalamnya. Rekombinan ialah organisma atau sel yang telah menjalani penggabungan semula genetik dan mempunyai DNA asing dalam genomnya. Sel bakteria sering digunakan sebagai sel perumah untuk transformasi dan plasmid dan bakteriofaj sering digunakan sebagai vektor dalam teknologi DNA rekombinan. Ini ialah perbezaan antara transforman dan rekombinan.
