Perbezaan Utama – Penanda Boleh Dipilih vs Gen Pelapor
Teknik kejuruteraan genetik digunakan untuk memindahkan gen penting daripada organisma kepada organisma lain. Memasukkan gen asing ke dalam genom organisma lain dan menjadikannya dinyatakan dalam sel perumah adalah langkah paling sukar dalam pemindahan gen. Untuk mengesan kejayaan proses transformasi, penanda boleh dipilih dan gen pelapor digunakan dalam molekul rekombinan. Penanda boleh dipilih ialah jujukan DNA atau gen yang mengekspresikan dan memilih sel yang diubah daripada sel yang tidak diubah. Gen reporter ialah gen lain yang digunakan untuk membezakan sel yang berubah dan untuk mengukur atau mengesan bagaimana gen yang dimasukkan berfungsi dalam perumah. Perbezaan utama antara penanda boleh dipilih dan gen wartawan ialah penanda boleh dipilih digunakan untuk menyaring keluar sel yang tidak berubah dan memberi isyarat kepada sel yang diubah manakala gen wartawan digunakan untuk mengukur tahap ekspresi gen dalam perumah.
Apakah itu Penanda Boleh Dipilih?
Dalam kejuruteraan genetik, gen yang diminati dimasukkan ke dalam vektor yang sesuai dan diubah menjadi organisma perumah. Walau bagaimanapun, transformasi hanya berjaya dalam sel perumah yang kompeten, dan terdapat kemungkinan sel perumah menolak pengambilan DNA asing. Oleh itu, pembezaan sel yang berubah dan tidak berubah adalah penting untuk meneruskan eksperimen selanjutnya. Oleh itu, penyelidik menggabungkan gen penanda yang boleh dipilih kepada vektor untuk memudahkan pemilihan sel yang diubah daripada sel yang tidak diubah. Penanda yang boleh dipilih ialah urutan DNA, terutamanya gen yang berguna dalam mengenal pasti sel yang diubah. Gen penanda ini mempamerkan sifat yang sesuai dengan pemilihan tiruan sel berubah daripada sel tidak berubah pada media.
Penanda boleh dipilih yang paling biasa digunakan dalam biologi molekul ialah gen tahan antibiotik. Gen rintangan antibiotik dimasukkan ke dalam vektor dan diubah menjadi sel perumah terutamanya kepada bakteria perumah. Antibiotik tertentu itu dimasukkan ke dalam medium pembiakan bakteria. Disebabkan kehadiran penanda terpilih, di bawah keadaan terpilih, hanya sel yang mengandungi penanda boleh pilih yang sesuai boleh bertahan. Sel yang tidak berubah tidak dapat tumbuh dalam medium yang mengandungi antibiotik. Oleh itu, disebabkan oleh penanda yang boleh dipilih yang tahan antibiotik, sel-sel yang diubah suai dikenal pasti dengan mudah.
Gen yang memberikan ciri untuk antimetabolit, racun herba digunakan sebagai penanda terpilih dalam vektor pengklonan dalam kejuruteraan genetik tumbuhan. Walau bagaimanapun, cotransformasi penanda terpilih ini kepada organisma yang diubah suai secara genetik mempunyai kesan negatif terhadap alam sekitar dan manusia. Pembebasan bakteria tahan antibiotik boleh meningkatkan kerintangan antibiotik patogen manusia. Ia boleh mencemarkan produk atau biojisim oleh antibiotik dan boleh kehilangan tekanan terpilih akibat daripada degradasi dan ketidakaktifan antibiotik.
Rajah 01: Vektor plasmid untuk pemindahan gen dengan penanda boleh dipilih
Apakah itu Gen Reporter?
Gen pelapor ialah gen yang membolehkan pengesanan atau pengukuran ekspresi gen yang dimasukkan. Gen wartawan ini boleh dilampirkan pada urutan pengawalseliaan gen yang diminati untuk menandakan lokasi atau tahap ekspresi. Oleh itu, semasa ekspresi gen di bawah promoter yang sama, ia ditranskripsikan ke dalam jujukan mRNA tunggal dan kemudian diterjemahkan ke dalam protein yang boleh menunjukkan tahap ekspresi gen.
Gen pelapor adalah daripada pelbagai jenis, dan ia mengandungi ciri-ciri yang boleh dikenal pasti secara visual yang biasanya terlibat dalam protein pendarfluor dan pendarfluor. Gen yang mengekodkan protein dan enzim pendarfluor, menukar substrat yang tidak kelihatan kepada produk bercahaya atau berwarna dengan memberi isyarat kepada ekspresi gen yang berjaya dan memberi peluang untuk kuantifikasi ekspresi gen.
Rajah 02: Ekspresi Gen Wartawan
Apakah perbezaan antara Penanda Boleh Dipilih dan Gene Pelapor?
Penanda Boleh Dipilih vs Gen Pelapor |
|
| Penanda boleh pilih ialah sejenis urutan DNA yang membantu membezakan sel yang diubah dengan sel yang tidak berubah. | Gen reporter ialah gen yang membantu mengukur ekspresi gen yang dikehendaki dimasukkan ke dalam sel perumah. |
| Sifat Unit Yang Dihasilkan | |
| Gen dikodkan dengan ciri yang membantu dalam pemilihan tiruan pada media tumbuh. | Gen dikodkan dengan ciri yang boleh dikenal pasti secara visual. |
| Penggunaan | |
| Gen rintangan antibiotik, gen antimetabolit, gen rintangan herbisida, dll. ialah contoh untuk penanda yang boleh dipilih. | Kod gen untuk protein pendarfluor hijau, β-glucuronidase, Chloramphenicol acetyltransferase, protein pendarfluor merah, dsb. adalah contohnya. |
Ringkasan – Penanda Boleh Dipilih vs Gen Pelapor
Penanda boleh pilih membenarkan sel yang diubah untuk tumbuh dalam media terpilih yang didos dengan antibiotik atau racun herba tertentu. Ia digunakan untuk pemilihan awal sel yang berubah. Gen wartawan digunakan untuk mengukur tahap ekspresi gen yang dikehendaki dimasukkan. Mereka juga membenarkan pembezaan sel berubah dan tidak berubah. Ini adalah perbezaan antara penanda boleh dipilih dan gen wartawan. Kedua-dua penanda boleh dipilih dan gen pelapor dianggap sebagai penanda penting dalam kejuruteraan genetik.
