Perbezaan utama antara immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation ialah immunoprecipitation ialah teknik yang memendakan protein daripada larutan menggunakan antibodi tertentu, manakala coimmunoprecipitation ialah teknik yang memendakan kompleks protein utuh daripada larutan menggunakan antibodi tertentu.
Interaksi antigen-antibodi ialah interaksi kimia khusus antara antibodi yang dihasilkan oleh sel B dan antigen (protein) semasa tindak balas imun. Biasanya, antigen larut bergabung dengan antibodi larut dengan kehadiran elektrolit pada suhu dan pH larut untuk membuat kompleks yang tidak larut kelihatan. Ini dipanggil tindak balas pemendakan. Oleh itu, immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation ialah dua jenis tindak balas pemendakan yang digunakan secara rutin dalam makmal untuk mengenal pasti protein seperti antigen.
Apakah itu Immunoprecipitation?
Imunopresipitasi ialah teknik memendakan protein daripada larutan menggunakan antibodi tertentu. Kadangkala, teknik ini juga dikenali sebagai imunopresipitasi protein individu. Imunopresipitasi menggunakan antibodi untuk mengasingkan protein terpilih yang diminati daripada lisat sel. Antibodi memurnikan protein sasaran khusus atau antigen daripada campuran. Antibodi mengikat protein, dan kompleks antibodi-antigen ditarik keluar daripada sampel. Dalam persediaan eksperimen, kompleks antigen-antibodi ditarik keluar menggunakan protein A/G berganding agarose atau manik magnet. Kemudian, manik dicuci, dan protein yang diminati dicairkan. Protein atau antigen yang telah dimurnikan yang diperolehi oleh imunopresipitasi disahkan melalui pelbagai teknik seperti ujian imunosorben berkaitan enzim (ELISA) dan western blot (WB).
Rajah 01: Imunopresipitasi
Tambahan pula, protein atau antigen terpencil boleh dikira dan dikenal pasti melalui spektrometri jisim dengan menggunakan corak pencernaan enzimatik berdasarkan jujukan primer. Terdapat pertimbangan tertentu sebelum memulakan percubaan imunopresipitasi: pilihan format kaedah, protein pengikat dan manik, memilih antibodi dan isotype primer yang betul serta kawalan negatif.
Apakah Coimmunoprecipitation?
Coimmunoprecipitation ialah teknik memendakan kompleks protein utuh daripada larutan menggunakan antibodi tertentu. Coimmunoprecipitation secara amnya berfungsi dengan memilih antibodi khusus yang menyasarkan protein (antigen) yang diketahui yang dipercayai merupakan ahli kompleks protein yang lebih besar. Dengan menyasarkan ahli yang dikenali dengan antibodi tertentu, adalah mungkin untuk menarik keseluruhan kompleks protein keluar daripada larutan. Ini membolehkan pengecaman ahli kompleks yang tidak diketahui. Konsep menarik kompleks protein daripada larutan kadangkala dirujuk sebagai mekanisme "tarik turun".
Rajah 02: B Coimunoprecipitation
Coimmunoprecipitation ialah teknik berkuasa yang digunakan untuk menganalisis interaksi protein-protein. Tujuan utama coimmunoprecipitation ialah pengenalpastian rakan kongsi yang berinteraksi seperti ligan, kofaktor, atau molekul isyarat kepada protein yang diminati. Selain itu, coimmunoprecipitation ialah teknik berkesan yang digunakan untuk memisahkan protein daripada serum, lisat sel, tisu homogen, atau media terkondisi.
Apakah Persamaan Antara Imunopresipitasi dan Koimunopresipitasi?
- Immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation ialah dua jenis teknik berasaskan tindak balas pemendakan.
- Kedua-dua teknik boleh digunakan untuk mengenal pasti antigen sasaran melalui antibodi tertentu.
- Kedua-dua teknik sangat bergantung pada interaksi antigen-antibodi.
- Ia digunakan secara rutin di makmal klinikal.
Apakah Perbezaan Antara Imunopresipitasi dan Koimunopresipitasi?
Immunoprecipitation ialah teknik yang memendakan protein daripada larutan menggunakan antibodi tertentu, manakala coimmunoprecipitation ialah teknik yang memendakan kompleks protein utuh daripada larutan menggunakan antibodi tertentu. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation. Tambahan pula, immunoprecipitation lebih kerap digunakan di makmal, manakala coimmunoprecipitation tidak biasa digunakan di makmal.
Maklumat di bawah menunjukkan perbezaan antara immunoprecipitation dan coimunoprecipitation dalam bentuk jadual untuk perbandingan sebelah menyebelah.
Ringkasan – Immunoprecipitation vs Coimmunoprecipitation
Immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation ialah dua jenis teknik berasaskan tindak balas pemendakan yang bergantung kepada interaksi antigen-antibodi. Teknik immunoprecipitation memendakan protein daripada larutan menggunakan antibodi tertentu, manakala teknik coimmunoprecipitation memendakan kompleks protein utuh daripada larutan menggunakan antibodi tertentu. Jadi, ini meringkaskan perbezaan antara immunoprecipitation dan coimmunoprecipitation.
