Perbezaan utama antara BL21 dan DH5 Alpha ialah BL21 ialah sel E. coli kompeten kejuruteraan genetik kekurangan protease yang digunakan terutamanya untuk ekspresi protein, manakala DH5 Alpha ialah sel E. coli kompeten yang direka bentuk secara genetik dengan mutasi recA1 digunakan terutamanya untuk transformasi plasmid.
E. coli adalah salah satu organisma pilihan yang terkenal untuk penghasilan protein rekombinan. Ia telah menjadi platform ekspresi paling popular selama ini. Ia juga digunakan sebagai kilang sel. BL21 dan DH5 Alpha ialah dua sel E. coli kejuruteraan genetik yang kini digunakan untuk ekspresi protein dan transformasi plasmid, masing-masing.
Apakah itu BL21?
BL21 ialah sel E.coli kompeten kejuruteraan genetik kekurangan protease yang digunakan terutamanya untuk ekspresi protein. E. coli BL21 ialah sel bakteria yang berasal daripada strain B. Ia mempunyai kecacatan Lon protease dan ompT membran luar protease. Ia biasanya digunakan untuk ekspresi protein rekombinan kerana ia biasanya membawa kestabilan kepada protein yang dinyatakan. BL21 berguna untuk ekspresi protein dengan DNA pCold I-IV dan DNA TF pCold. Tetapi sel E. coli yang kompeten ini tidak bertujuan untuk sistem ekspresi protein menggunakan promoter T7 seperti sistem pET. Sebab di sebalik ini ialah BL21 tidak mengekspresikan polimerase RNA T7. Selain itu, ia tidak disyorkan untuk digunakan untuk pembinaan atau penyediaan plasmid kerana ia tidak mempunyai mutasi recA.
Rajah 01: BL21
BL21 pertama kali diterangkan oleh Studier pada tahun 1986 selepas pelbagai pengubahsuaian garis B. Sel BL21 kekurangan protease LON, yang merendahkan banyak protein asing. Tambahan pula, ia kehilangan satu lagi gen yang mengekodkan protease membran luar (OmpT) yang berfungsi untuk merendahkan protein ekstraselular. Kekurangan protein ini mencetuskan kejayaan penghasilan protein asing dalam sel E. coli BL21. Tambahan pula, mutasi hsdSB dalam sel ini menghalang metilasi DNA asing dan gangguan dalam sel BL21.
Apakah DH5 Alpha?
DH5 Alpha ialah sel E. coli kompeten yang direka bentuk secara genetik dengan mutasi recA1 yang digunakan terutamanya untuk transformasi plasmid. Sel DH5 Alpha E. coli direka bentuk secara genetik oleh ahli biologi Amerika Douglas Hanahan untuk memaksimumkan kecekapan transformasi. Sel DH5 Alpha mempunyai tiga mutasi yang berbeza: recA1, endA1, dan lacZΔM15. recA1 ialah mutasi titik tunggal yang menggantikan glisin 160 dengan dan sisa asid aspartik dalam polipeptida recA. Mutasi ini melumpuhkan aktiviti rekombinasi dan menyahaktifkan penggabungan semula homolog. mutasi endA1 menyahaktifkan endonuklease intraselular yang menghalangnya daripada merendahkan plasmid yang dimasukkan.
Rajah 02: DH5 Alpha
Selain itu, mutasi lacZΔM15 membolehkan saringan biru-putih bagi sel yang diubah. Sel-sel ini adalah sel yang cekap. Mereka sering digunakan dengan transformasi kalsium klorida untuk memasukkan plasmid yang dikehendaki. Kajian baru-baru ini telah dikenal pasti bahawa sel DH5 Alpha dengan kaedah Hanahan adalah sel cekap yang paling cekap untuk transformasi plasmid.
Apakah Persamaan Antara BL21 dan DH5 Alpha?
- BL21 dan DH5 Alpha ialah dua kejuruteraan genetik E.coli
- Kedua-duanya adalah sel yang cekap.
- Ia terdiri daripada mutasi yang berbeza.
- Keduanya tidak mempunyai habitat semula jadi.
- Ini digunakan untuk tujuan makmal seperti kajian ekspresi dan prosedur pengklonan.
Apakah Perbezaan Antara BL21 dan DH5 Alpha?
BL21 ialah sel E. coli kompeten kejuruteraan genetik kekurangan protease yang digunakan terutamanya untuk ekspresi protein. Sebaliknya, DH5 Alpha ialah sel E. coli kompeten yang direka bentuk secara genetik dengan mutasi recA1 yang digunakan terutamanya untuk transformasi plasmid. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara BL21 dan DH5 Alpha. Tambahan pula, sel BL21 E. coli tidak mempunyai mutasi recA1, manakala sel DH5 Alpha E. coli mempunyai mutasi recA1.
Maklumat berikut menyenaraikan perbezaan antara BL21 dan DH5 Alpha dalam bentuk jadual.
Ringkasan – BL21 lwn DH5 Alpha
Strine bukan patogen E. coli dibangunkan secara genetik oleh saintis untuk kajian ekspresi makmal dan tujuan pengklonan. BL21 dan DH5 Alpha ialah dua sel E. coli yang direka bentuk secara genetik. BL21 digunakan terutamanya untuk kajian ekspresi protein. Sebaliknya, DH5 Alpha digunakan terutamanya untuk tujuan transformasi plasmid. Oleh itu, ini ialah ringkasan perbezaan antara BL21 dan DH5 Alpha.
