Perbezaan utama antara kromatografi afiniti dan pertukaran ion ialah kita boleh menggunakan kromatografi afiniti untuk mengasingkan komponen bercas atau tidak bercas dalam campuran manakala kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk mengasingkan komponen bercas dalam campuran.
Kromatografi ialah teknik yang boleh kita gunakan untuk mengasingkan komponen yang dikehendaki dalam campuran. Terdapat pelbagai jenis seperti kromatografi cecair, kromatografi gas, dll. Kromatografi afiniti dan kromatografi pertukaran ion ialah dua subkategori kromatografi cecair. Juga, dalam teknik ini, terdapat dua fasa. Iaitu, ia adalah fasa pegun dan fasa bergerak. Tujuan teknik ini adalah untuk memisahkan komponen, bergantung pada pengikatan komponen, dalam fasa bergerak ke permukaan fasa pegun.
Apakah itu Kromatografi Perkaitan?
Kromatografi pertalian ialah teknik biokimia yang kami gunakan untuk mengasingkan komponen dalam campuran bergantung pada interaksi antara komponen ini.
Interaksi yang kami gunakan dalam kes ini termasuk yang berikut:
- Interaksi antigen-antibodi
- Interaksi enzim-substrat
- Interaksi ligan reseptor
- Interaksi asid protein-nukleik
Dalam teknik ini, kami menggunakan sifat molekul molekul untuk teknik pengasingan ini. Di sini, kami membenarkan sebatian yang dikehendaki berinteraksi dengan fasa pegun melalui ikatan hidrogen, interaksi ionik, jambatan disulfida, interaksi hidrofobik, dsb. Molekul yang tidak berinteraksi dengan fasa pegun akan mencair terlebih dahulu. Oleh itu, kita boleh memisahkannya daripada campuran. Sebatian yang dikehendaki akan kekal melekat pada fasa pegun. Oleh itu, kita boleh menanggalkannya menggunakan pelarut elusi dan menjadikannya cair untuk memisahkannya juga.
Rajah 01: Lajur Kromatografi
Kromatografi pertalian berguna dalam penulenan dan penumpuan bahan daripada campuran menggunakan larutan penimbal. Juga, ia membantu dalam mengurangkan bahan yang tidak diingini dalam campuran. Apabila mempertimbangkan radas yang kami gunakan untuk proses ini, kami harus menggunakan lajur yang diisi dengan fasa pegun kami. Kemudian, kita harus memuatkan fasa mudah alih yang mengandungi biomolekul yang akan kita pisahkan. Seterusnya, biarkan mereka mengikat dengan fasa pegun. Selepas itu, menggunakan penimbal pencuci, kita boleh mengasingkan biomolekul bukan sasaran, tetapi molekul sasaran harus mempunyai pertalian yang tinggi untuk fasa pegun untuk menjayakan proses pengasingan.
Apakah Kromatografi Pertukaran Ion?
Kromatografi ion ialah satu bentuk kromatografi cecair di mana kita boleh menganalisis bahan ionik. Selalunya, kami menggunakannya untuk menganalisis anion dan kation tak organik (iaitu anion klorida dan nitrat dan kalium, kation natrium). Walaupun ia kurang biasa, kita boleh menganalisis ion organik juga. Selain itu, kita boleh menggunakan teknik ini untuk penulenan protein kerana protein adalah molekul bercas pada nilai pH tertentu. Di sini, kami menggunakan fasa pegun pepejal di mana zarah bercas boleh melekat. Sebagai contoh, kita boleh menggunakan kopolimer resin polistirena-divinilbenzena sebagai sokongan pepejal.
Rajah 02: Fasa Kromatografi Pertukaran Ion
Untuk menjelaskan perkara ini dengan lebih lanjut, fasa pegun mempunyai ion tetap seperti anion sulfat atau kation amina kuaterner. Setiap daripada ini harus dikaitkan dengan pembilang (ion dengan cas berlawanan), jika kita ingin mengekalkan neutraliti sistem ini. Di sini, jika counterion adalah kation, maka kami menamakan sistem sebagai resin pertukaran kation. Tetapi, jika pembilang adalah anion, sistemnya ialah resin penukar anion.
Terdapat lima fasa utama dalam proses pertukaran ion;
- Peringkat awal
- Penjerapan sasaran
- Permulaan elusi
- Tamat elusi
- Penjanaan Semula
Apakah Perbezaan Antara Afiniti dan Kromatografi Pertukaran Ion?
Kromatografi pertalian ialah teknik biokimia yang kami gunakan untuk mengasingkan komponen dalam campuran bergantung pada interaksi antara komponen ini manakala kromatografi ion ialah satu bentuk kromatografi cecair di mana kami boleh menganalisis bahan ionik. Oleh itu, perbezaan utama antara kromatografi afiniti dan pertukaran ion ialah kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion hanya untuk pengasingan bahan ionik manakala kromatografi afiniti mampu memisahkan kedua-dua zarah bercas dan tidak bercas. Apabila mempertimbangkan prinsip kerja, perbezaan antara kromatografi pertalian dan pertukaran ion ialah kromatografi pertalian berterusan disebabkan oleh fakta bahawa molekul sasaran mempunyai pertalian tinggi untuk fasa pegun. Walau bagaimanapun, untuk kromatografi pertukaran ion, molekul sasaran mempunyai cas yang bertentangan dengan cas permukaan fasa pegun.
Maklumat di bawah menunjukkan perbezaan antara kromatografi afiniti dan pertukaran ion sebagai perbandingan sebelah menyebelah.
Ringkasan – Kromatografi Perkaitan vs Pertukaran Ion
Ringkasnya, kromatografi afiniti dan pertukaran ion ialah dua bentuk teknik kromatografi cecair. Perbezaan utama antara kromatografi afiniti dan pertukaran ion ialah kita boleh menggunakan kromatografi afiniti untuk mengasingkan komponen bercas atau tidak bercas dalam campuran manakala kita boleh menggunakan kromatografi pertukaran ion untuk mengasingkan komponen bercas dalam campuran.
