Perbezaan utama antara ujian mikronukleus dan komet ialah ujian mikronukleus adalah penting untuk memeriksa kerosakan kromosom akibat pendedahan mutagen, manakala ujian komet penting untuk mengesan kerosakan DNA primer dalam sel individu.
Ujian genotoksisiti membantu menilai kemungkinan mutasi dan keabnormalan kromosom. Genotoxin termasuk bahan kimia dan sinaran. Karsinogen, mutagen, dan teratogen adalah kategori utama genotoksin. Ia menyebabkan pelbagai kerosakan seperti mutasi titik, pemadaman, pemecahan untaian tunggal dan berganda, penyimpangan kromosom, pembentukan mikronukleus, pembaikan DNA dan interaksi kitaran sel. Keadaan sedemikian boleh membawa kepada pelbagai jenis penyakit, dan ujian genotoksisiti menghalang potensi kerosakan daripada keadaan ini. Ujian mikronukleus dan ujian komet ialah dua teknik di bawah ujian genotoksisiti.
Apakah Micronucleus Assay?
Micronucleus assay ialah ujian untuk menilai kerosakan kromosom akibat pendedahan mutagen. Ia penting dalam menyaring bahan kimia yang menyebabkan pembentukan gelendong dan mikronukleus. Ujian mikronukleus memberikan maklumat tentang kestabilan bahan kimia apabila mengganggu struktur dan fungsi kromosom. Banyak karsinogen menguji positif dalam ujian mikronukleus. Proses ujian melibatkan rawatan kimia dan mengukur kekerapan sel mikronukleus. Jika terdapat peningkatan yang tidak normal dalam bilangan sel mikronukleus, ia menyimpulkan bahawa bahan kimia tersebut menyebabkan kerosakan kromosom.
Ujian mikronukleus biasanya dijalankan pada sel yang membahagikan secara aktif. Oleh itu, eritrosit dan sel stem sumsum tulang yang dihasilkan melalui pembahagian sel adalah calon yang sesuai untuk ujian tersebut. Mereka mengalami pusing ganti yang berterusan dan pantas. Memandangkan eritrosit tidak mempunyai nukleus sejati, ia menjadikan sel mikronukleus lebih kelihatan pada penghujung ujian.
Rajah 01: Pemerhatian Ujian Mikronukleus
Ujian Micronucleus adalah menjimatkan, lebih pantas, mudah dan memerlukan lebih sedikit kemahiran untuk dijalankan. Ia mencerminkan penyimpangan kromosom dengan cepat dengan cara yang boleh dipercayai dan amat berguna untuk menilai kerosakan kromosom dengan cepat. Jenis ujian mikronukleus yang istimewa dan serba boleh ialah ujian sitokinesis blok micronucleus cytome (CBMNcyt). Ia adalah ujian yang lebih baik untuk mengukur kerosakan kromosom dan ketidakstabilan dalam sel. Walau bagaimanapun, masalah utama menggunakan ujian mikronukleus ialah ia tidak dapat menentukan pelbagai jenis penyimpangan kromosom, dan ujian mempunyai pengaruh ke atas kadar mitosis dan bahagian kematian sel, menyebabkan keputusan berubah.
Apakah itu Ujian Komet?
Ujian komet, yang juga dikenali sebagai ujian elektroforesis gel tunggal, ialah teknik mudah dan sensitif untuk mengesan kerosakan DNA. Ia mengukur pecahan DNA dalam sel eukariotik dan merupakan teknik standard untuk biomonitoring dan ujian genotoksisiti.
Ujian komet terlibat dalam pengkapsulan sel dalam ampaian agarosa takat lebur rendah, lisis sel dalam keadaan neutral atau beralkali, dan elektroforesis sel terampai terlisis. Semasa proses enkapsulasi, sel-sel digantung dalam agarose takat lebur rendah cair, dan agarosa membentuk matriks gentian karbohidrat untuk menambatnya pada tempatnya. Agarose adalah neutral secara osmotik; oleh itu, ia membolehkan penyelesaian untuk menembusi melalui gel dan menjejaskan sel tanpa mengganggu dan mengalihkannya. Larutan lisis ialah larutan garam berair yang sangat pekat dan detergen. Garam ini mengganggu protein dan corak ikatan dalam sel sambil mengganggu kandungan RNA sel. Sel-sel memusnahkan, dan semua protein, RNA, konstituen sitoplasma dan nukleoplasma, mengganggu dan meresap ke dalam matriks agarose, meninggalkan DNA.
Rajah 02: Ujian Komet
Larutan elektroforesis ialah larutan beralkali di mana heliks ganda DNA denatur, dan nukleoid menjadi untai tunggal. Semasa proses ini, medan elektrik digunakan untuk menganalisis imej. Analisis imej mengukur keamatan keseluruhan pendarfluor untuk DNA dan nukleoid dan membandingkan keduanya. Struktur keseluruhannya menyerupai komet dengan kepala bulat yang sepadan dengan baki DNA yang tidak rosak dan ekor untuk DNA yang rosak. Semakin cerah dan panjang ekor disebabkan isyarat yang lebih kuat, semakin tinggi tahap kerosakan.
Apakah Persamaan Antara Mikronukleus dan Ujian Komet?
- Micronucleus dan ujian komet adalah menjimatkan, lebih pantas, mudah dan memerlukan lebih sedikit kemahiran.
- Ia dilakukan terutamanya pada DNA.
- Kedua-dua ujian membantu dalam menilai mutasi dan keabnormalan kromosom.
- Selain itu, kedua-dua teknik menggunakan bahan kimia untuk menjalankan prosedur.
Apakah Perbezaan Antara Mikronukleus dan Ujian Komet?
Ujian mikronukleus adalah penting dalam memeriksa kerosakan kromosom akibat daripada pendedahan mutagen, manakala ujian komet penting dalam mengesan kerosakan DNA primer dalam sel individu. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara mikronukleus dan ujian komet. Selain itu, ujian mikronukleus telah ditetapkan dengan baik untuk mengesan klastogenisiti dan anegenisitas. Ujian komet digunakan sebagai ujian genotoksisiti untuk mengesan kerosakan DNA primer dalam sel. Selain itu, ujian mikronukleus memberikan maklumat tentang kestabilan bahan kimia, manakala ujian komet ialah elektroforesis gel sel tunggal.
Maklumat di bawah menunjukkan perbezaan antara mikronukleus dan ujian komet dalam bentuk jadual untuk perbandingan sebelah menyebelah.
Ringkasan – Micronucleus vs Comet Assay
Ujian genotoksisiti membantu menilai kemungkinan mutasi dan keabnormalan kromosom. Ujian mikronukleus dan ujian komet adalah dua teknik di bawah ujian genotoksisiti. Ujian mikronukleus menilai kerosakan kromosom akibat pendedahan mutagen. Ujian komet adalah teknik mudah dan sensitif untuk mengesan kerosakan DNA. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara micronucleus dan assay komet. Ujian mikronukleus adalah penting dalam pemeriksaan bahan kimia yang menyebabkan pembentukan gelendong dan mikronukleus. Ujian komet terlibat dalam pengkapsulan sel dalam ampaian agarosa takat lebur rendah, lisis sel dalam keadaan neutral atau alkali dan elektroforesis sel terampai terlisis.
