Perbezaan utama antara radioimmunoassay dan immunoradiometric assay ialah dalam radioimmunoassay, sampel atau sebatian yang akan diukur digabungkan dengan antigen radioaktif sebelum gabungan, manakala dalam ujian immunoradiometric, sampel atau kompaun serta-merta bergabung dengan radiolabeled. antibodi.
Immunoassay ialah ujian biokimia yang mengesan kehadiran atau kepekatan makromolekul dalam larutan menggunakan antibodi atau antigen. Antibodi pendarfluor dan radioaktif digunakan untuk mengukur antigen dalam sampel. Pada mulanya, antibodi digunakan dalam teknik pemendakan seperti immunoprecipitation, immunodiffusion dan immune-electrophoresis untuk analisis protein serum. Pada masa ini, teknik yang sangat sensitif seperti ujian radioimmunoassay dan immunoradiometrik digunakan untuk pengukuran ubat, penanda tumor dan hormon.
Apakah itu Ujian Radioimmunoassay?
Radioimmunoassay (RIA) ialah immunoassay yang menggunakan unsur radioaktif pembentukan bertahap kompleks antigen-antibodi. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif untuk mengesan jumlah antigen dalam sampel. RIA ialah ujian in vitro yang sangat spesifik dan sangat sensitif. Prinsip di sebalik RIA adalah mengikat kompetitif. Di sini, antigen radioaktif bersaing dengan antigen bukan radioaktif untuk jumlah antibodi atau tapak pengikat reseptor yang tetap. RIA memerlukan pelesenan dan langkah berjaga-jaga khas kerana bahan radioaktif digunakan, dan ia kekal antara teknik yang paling murah.
Rajah 01: Immunoassay
Semasa RIA, jumlah antigen yang diketahui kerap dibuat radioaktif dengan melabelkannya dengan isotop radioaktif gamma iodin yang dilekatkan pada tirosin. Kemudian antigen ini digabungkan dengan jumlah antibodi yang diketahui. Di sini, kedua-dua antigen dan antibodi secara khusus mengikat satu sama lain. Kemudian, sampel darah-serum ditambah untuk memulakan tindak balas persaingan antara antigen berlabel dan antigen tidak berlabel dalam serum dengan antibodi khusus. Dalam tindak balas ini, antibodi melepaskan sejumlah antigen berlabel. Kuantiti ini adalah berkadar dengan nisbah antigen berlabel kepada tidak berlabel. Akhirnya, lengkung pengikat dihasilkan untuk memperoleh jumlah antigen dalam serum darah pesakit.
Apakah itu Ujian Imunoradiometrik?
Ujian imunoradiometrik (IRMA) ialah immunoassay yang menggunakan antibodi berlabel radio. Dalam IRMA, antibodi dilabel menggunakan radioisotop. Antibodi ini mengikat antigen yang terdapat dalam sampel tertentu. Dalam sampel positif, antibodi yang dilabel secara radioaktif mengikat epitop bebas antigen. Ini membentuk kompleks antigen-antibodi.
Semasa tindak balas kedua, antibodi berlabel yang tidak terikat dikeluarkan menggunakan antigen fasa pepejal. Baki bilangan antibodi radioaktif dalam larutan adalah fungsi langsung kepekatan antigen. IRMA dikenali sebagai ujian reagen berlebihan di mana lebihan antibodi berlabel radio digunakan sebagai reagen. Di sini, kepekatan berlebihan antibodi atau antigen berlabel dibenarkan untuk bertindak balas. Sebagai langkah terakhir, antibodi terikat antigen dan bebas dipisahkan, dan pecahan terikat antigen tertakluk kepada ujian radioaktif. Di sini, aktiviti pecahan adalah berkadar terus dengan kepekatan antigen.
Apakah Persamaan Antara Radioimmunoassay dan Immunoradiometric Assay?
- Kedua-dua ujian radioimmunoassay dan immunoradiometrik ialah immunoassay yang menggunakan unsur radioaktif dalam pembentukan kompleks antigen-antibodi secara berperingkat.
- Ia membentuk kompleks antigen-antibodi.
Apakah Perbezaan Antara Radioimmunoassay dan Immunoradiometric Assay?
Radioimmunoassay ialah immunoassay yang menentukan tahap antibodi oleh antigen yang dilabelkan dengan radioisotop manakala ujian immunoradiometric ialah ujian reagen berlebihan yang menggunakan lebihan kepekatan antibodi berlabel radio. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara radioimmunoassay dan immunoradiometric assay. IRMA mampu memberikan sensitiviti yang lebih tinggi daripada RIA. Dalam RIA, antigen dilabelkan dengan isotop gamma-radioaktif iodin manakala dalam antibodi IRMA, dilabel menggunakan isotop iodin. Jadi, ini juga merupakan perbezaan antara radioimmunoassay dan immunoradiometric assay. Memandangkan IRMA ialah teknik reagen berlebihan, ujian dilakukan dalam masa yang lebih singkat daripada RIA.
Jadual berikut meringkaskan perbezaan antara ujian radioimunoassay dan ujian imunoradiometrik.
Ringkasan – Radioimmunoassay vs Immunoradiometric Assay
Radioimmunoassay ialah immunoassay yang menggunakan unsur radioaktif dalam pembentukan berperingkat untuk menentukan tahap antibodi. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif. Antigen radioaktif bersaing dengan antigen bukan radioaktif untuk jumlah antibodi atau tapak pengikat reseptor yang tetap. Ujian immunoradiometrik ialah immunoassay yang dijalankan untuk menentukan tahap antigen sampel menggunakan antibodi berlabel radio. Antibodi ini mengikat antigen yang terdapat dalam sampel tertentu. Pada akhir setiap ujian, kompleks antigen-antibodi terbentuk. Untuk mendapatkan keputusan ujian, lengkung pengikat dilukis. Dalam radioimmunoassay, kuantiti antigen berlabel adalah berkadar dengan nisbah antigen berlabel kepada antigen tidak berlabel, tetapi dalam ujian immunoradiometrik, aktiviti pecahan terikat antigen adalah berkadar terus dengan kepekatan antigen. Ini adalah ringkasan perbezaan antara ujian radioimmunoassay dan immunoradiometrik.
