Perbezaan Utama – RNASE A lwn RNASE H
Ribonuklease ialah nuklease yang secara khusus merendahkan RNA kepada unit yang lebih kecil. Mereka boleh dibahagikan kepada dua kategori; endoribonucleases dan exoribonucleases. Endoribonuclease ialah endonuklease yang boleh merendahkan RNA untai tunggal atau untai berganda. Ia memutuskan ikatan fosfodiester dalam rantai polinukleotida RNA. Contohnya ialah RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P dan RNase H. Exoribonuclease ialah eksonuklease yang merendahkan RNA dengan mengalihkan nukleotida terminal daripada sama ada 5’hujung atau 3’hujung molekul RNA. Contohnya ialah RNase R, RNase II, RNase D dan RNase PH. Perbezaan utama antara RNASE A dan RNASE H ialah RNase A ialah ribonuklease pankreas yang secara khusus merendahkan RNA untai tunggal kepada komponen yang lebih kecil manakala RNase H ialah enzim tidak spesifik yang memecahkan RNA dalam hibrid RNA-DNA kepada unit yang lebih kecil melalui mekanisme hidrolitik.
Apakah RNASE A?
Rnase A ialah ribonuklease pankreas yang secara khusus membelah sisa sitosin dan urasil yang tidak berpasangan pada hujung 3’ RNA untai tunggal. RNase H berfungsi pada kepekatan garam yang lebih tinggi (0.3M atau kepekatan NaCl yang lebih tinggi). Tindak balas hidrolitik adalah dua langkah. Ia membentuk produk terfosforilasi 3' melalui perantaraan monofosfat kitaran 2', 3'. Walaupun ia khusus untuk RNA untai tunggal pada kepekatan garam yang lebih tinggi, ia juga boleh merendahkan RNA untai dua dan RNA dalam hibrid RNA-DNA pada kepekatan NaCl yang lebih rendah (lebih rendah daripada 0.3M NaCl).
Bruce Merrifield mula-mula mensintesis enzim ini. RNase A adalah enzim yang sangat popular dalam penyelidikan molekul. RNase A pankreas lembu adalah contoh RNase A. Dan ia adalah salah satu enzim paling tahan lasak yang digunakan dalam makmal. Enzim ini tidak memerlukan kofaktor untuk aktivitinya. Ia adalah enzim yang sangat stabil. RNase A ialah enzim pertama dan protein ketiga yang urutan asid amino yang betul telah dikesan. Enzim ini sangat kecil dengan 124 asid amino dan jisim molekul 12600da. Dan ia mempunyai empat residu Histidine (His 12 dan His 119 yang terlibat dalam tindak balas pemangkin).
Rajah 01: RNase A
RNase A boleh diasingkan dengan merebus sampel mentah. Apabila mendidih, semua enzim lain merendahkan baki RNase A. RNase A ialah enzim yang sangat stabil. Enzim ini menghalang protein perencat ribonuklease, logam berat dan kompleks uridin vanadate.
Apakah RNase H?
Rnase H ialah enzim ribonuklease tidak spesifik yang boleh merendahkan RNA dalam hibrid RNA-DNA melalui tindak balas hidrolitik. RNase H memutuskan ikatan 3'- OP RNA dalam hibrid RNA-DNA. Akhirnya ia menghasilkan produk yang ditamatkan fosfat 3'OH dan 5'. Dalam replikasi DNA ia memainkan peranan penting dengan mengeluarkan primer RNA selepas helai DNA baru terbentuk. Dalam keadaan makmal, ia secara khusus merendahkan RNA dalam hibrid RNA-DNA tetapi bukan DNA dan RNA tidak hibrid. Dan enzim ini biasanya digunakan untuk memusnahkan templat RNA selepas untaian DNA pelengkap pertama terbentuk semasa sintesis cDNA.
Rajah 02: RNase H
RNase H juga menggunakan dalam ujian perlindungan nuklease. Ia juga boleh digabungkan dengan penyingkiran ekor poli A daripada mRNA. RNase H mempunyai keupayaan untuk memusnahkan RNA bukan pengekodan di dalam dan di luar sel. Ion logam diperlukan sebagai kofaktor untuk aktiviti protein ini. Chelator (EDTA) boleh digunakan untuk menghalang enzim RNase H.
Apakah Persamaan Antara RNASE A dan RNASE H?
- Kedua-duanya bersifat protein.
- Kedua-duanya ialah endoribonuclease
- Kedua-duanya boleh merendahkan RNA.
- Kedua-duanya melakukan tindak balas hidrolitik.
- Makmal molekul menggunakan kedua-duanya.
Apakah Perbezaan Antara RNASE A dan RNASE H?
RNASE A lwn RNASE H |
|
| RNase A ialah ribonuklease pankreas yang secara khusus membelah hujung 3’ sisa sitosin dan urasil yang tidak berpasangan bagi RNA untai tunggal pada kepekatan garam yang lebih tinggi. | RNase H ialah enzim ribonuklease tidak spesifik yang boleh merendahkan RNA dalam hibrid RNA-DNA melalui tindak balas hidrolitik. |
| Sifat Pembelahan RNA | |
| RNase A secara khusus membelah RNA untai tunggal pada kepekatan garam yang lebih tinggi. | RNase H membelah RNA dalam hibrid RNA- DNA. |
| Keperluan Faktor Bersama untuk Aktiviti | |
| RNase A tidak memerlukan kofaktor untuk aktivitinya. | RNase H memerlukan ion logam sebagai kofaktor untuk aktivitinya. |
| Perencat Aktiviti Protein | |
| Protein perencat ribonuclease, logam berat dan kompleks uridin vanadate menghalang aktiviti RNAse A. | A chelator (EDTA) menghalang aktiviti RNase H. |
| Penyingkiran Primer RNA dalam Replikasi DNA | |
| RNase A tidak digunakan untuk penyingkiran primer RNA dalam replikasi DNA. | RNase H digunakan untuk penyingkiran primer RNA dalam replikasi DNA |
| Penyingkiran Templat DNA dalam Sintesis DNA Pelengkap (C-DNA) | |
| RNase A tidak digunakan untuk penyingkiran templat RNA semasa sintesis DNA (C-DNA) pelengkap. | RNase H digunakan untuk penyingkiran templat RNA semasa sintesis DNA (C-DNA) pelengkap. |
| Penyingkiran Poly-A-Tail dalam mRNA Hibrid kepada Oligo (dt) | |
| RNase A tidak digunakan untuk mengeluarkan “ekor poli-A” dalam mRNA yang dihibridkan kepada oligo (dt). | RNase H digunakan untuk membuang “ekor poli-A” dalam mRNA yang dihibridkan kepada oligo (dt) |
Ringkasan – RNASE A lwn RNASE H
Ribonuklease ialah enzim nuklease yang mempunyai keupayaan untuk membelah RNA kepada unit yang lebih kecil. Mereka adalah dua jenis; endoribonucleases dan exoribonucleases. Endoribonuclease ialah endonuklease yang mempunyai keupayaan untuk merendahkan RNA untai tunggal atau untai dua. Dan ia memutuskan ikatan fosfodiester dalam rantai polinukleotida RNA. RNase A dan RNase H ialah dua endoribonuklease. RNase A ialah ribonuklease pankreas yang secara khusus membelah sisa sitosin dan urasil yang tidak berpasangan pada 3’ hujung RNA untai tunggal pada kepekatan garam yang lebih tinggi. RNase H ialah enzim ribonuklease tidak spesifik yang boleh merendahkan RNA dalam hibrid RNA-DNA melalui tindak balas hidrolitik. Ini ialah perbezaan antara RNase A dan RNase H.
Muat turun PDF RNASE A vs RNASE H
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara RNASE A dan RNASE H
