Perbezaan utama antara FISH dan CGH ialah FISH ialah teknik molekul yang mengesan jujukan DNA tertentu pada kromosom menggunakan probe berlabel pendarfluor, manakala CGH ialah satu lagi teknik sitogenetik molekul yang mengesan perubahan dalam DNA genomik.
Analisis sitogenetik memainkan peranan penting dalam perubatan apabila mengesan keabnormalan kromosom seperti aneuploidi, penghapusan, penduaan dan penyusunan semula, dsb. Keabnormalan kromosom akhirnya membawa kepada penyakit genetik seperti kanser, ketidaksuburan, sindrom Down, sindrom Klinefelter, Turner sindrom, leukemia, dll. Terdapat pelbagai kaedah sitogenetik molekul untuk mengesan kecacatan dan penyakit yang dinyatakan di atas. Antaranya, FISH (pendarfluor in situ hibridisasi) dan CGH (hibridisasi genomik perbandingan) adalah dua teknik hibridisasi yang berkuasa. Walau bagaimanapun, kedua-dua kaedah mempunyai kebaikan dan keburukan.
Apakah IKAN?
IKAN ialah teknik hibridisasi asid nukleik yang dilakukan pada bahagian atau bahagian tisu, dalam keseluruhan tisu atau sel. Ia adalah kaedah berasaskan siasatan. Teknik ini bergantung pada teori pasangan asas pelengkap Watson Crick, menghasilkan sama ada DNA - kacukan DNA atau kacukan DNA - RNA, yang dengan itu boleh mengesan gen bermutasi atau boleh mengenal pasti gen yang diminati. Selanjutnya, teknik ini menggunakan jujukan DNA untai tunggal, jujukan DNA untai dua, jujukan RNA untai tunggal atau oligonukleotida sintetik yang disediakan menggunakan terjemahan nick sebagai probe yang menjadi pelengkap kepada jujukan gen yang diminati. Selain itu, ciri yang paling penting dalam teknik ini ialah pelabelan probe dengan pewarna pendarfluor. Oleh itu, probe mengikat dengan bahagian pelengkap kromosom dan memudahkan pengesanan.
Selain itu, FISH ialah kaedah yang sangat sensitif dan khusus. Oleh itu, ia adalah teknik biasa dalam kedua-dua penyelidikan dan diagnosis keganasan hematologi dan tumor pepejal. Tetapi, FISH menunjukkan resolusi rendah. Ia juga memerlukan pengetahuan awal tentang keabnormalan sasaran untuk mereka bentuk urutan siasatan.
Rajah 01: IKAN
Terdapat banyak aplikasi FISH, terutamanya dalam diagnostik molekul penyakit berjangkit untuk mengenal pasti kehadiran patogen dan mengesahkan patogen melalui diagnostik molekul. Selain itu, FISH ialah teknik yang biasa digunakan dalam bidang biologi perkembangan, karyotyping dan analisis filogenetik serta pemetaan fizikal kromosom.
Apakah itu CGH?
Hibridisasi genomik perbandingan (CGH) ialah satu lagi teknik sitogenetik molekul berasaskan DNA yang boleh mengesan perubahan urutan DNA genom. Kaedah ini adalah kaedah lanjutan yang boleh menganalisis kromosom dan pengubahsuaian gen untuk mengesan perubahan atau perubahan dalam jujukan DNA genomik. Selanjutnya, CGH memerlukan pengasingan dan pemecahan DNA daripada sampel eksperimen dan sampel rujukan. Kemudian, sampel hendaklah dilabelkan menggunakan dua pewarna pendarfluor yang berbeza (biasanya merah dan hijau). Kemudian, kedua-dua sampel dicampur dan dibenarkan untuk hibridisasi kompetitif. Langkah terakhir ialah analisis sampel untuk perubahan dalam DNA seperti pertindihan gen, kehilangan gen, dll. Terutamanya, ia mengukur perbezaan nombor salinan DNA antara sampel ujian dan sampel kawalan.
Rajah 02: CGH
Versi lain CGH tersedia sekarang; ia adalah kaedah yang lebih maju daripada CGH biasa. Ia adalah teknik yang dipanggil CGH berasaskan tatasusunan atau aCGH. aCGH membenarkan pengenalpastian tepat gen atau pemadaman jujukan dalam beribu-ribu jujukan dalam satu percubaan.
Apakah Persamaan Antara FISH dan CGH?
- IKAN dan CGH ialah dua teknik molekul.
- Kedua-dua FISH dan CGH bergantung pada hibridisasi asid nukleik.
- Selain itu, kedua-dua teknik memerlukan probe yang direka untuk mengesan sasaran DNA tertentu.
- Kami menggunakannya untuk diagnosis penyakit genetik pra-natal dan selepas bersalin.
- Selain itu, FISH dan CGH adalah alat yang sangat berkuasa untuk mengkaji perubahan genomik.
- Mereka menggunakan pewarna pendarfluor untuk melabelkan kuar.
Apakah Perbezaan Antara IKAN dan CGH?
FISH ialah prosedur hibridisasi in situ yang menggunakan probe pendarfluor untuk mengesan jujukan DNA tertentu, manakala CGH ialah teknik hibridisasi molekul yang mengesan perubahan jujukan DNA genomik. Jadi, inilah perbezaan utama antara FISH dan CGH.
Selain itu, FISH memerlukan pengetahuan awal tentang keabnormalan sasaran untuk mereka bentuk urutan probe, manakala CGH tidak memerlukan pengetahuan terdahulu. Selain itu, perbezaan selanjutnya antara FISH dan CGH ialah FISH menunjukkan peleraian terhad manakala aCGH menunjukkan peleraian tinggi.
Maklumat maklumat di bawah meringkaskan perbezaan antara FISH dan CGH.
Ringkasan – FISH lwn CGH
FISH dan CGH ialah dua teknik sitogenetik molekul yang memudahkan pengesanan jujukan gen yang diminati. FISH memudahkan pengesanan jujukan DNA tertentu pada kromosom menggunakan probe berlabel pendarfluor manakala CGH memudahkan pengesanan perubahan dalam DNA genomik. Jadi, inilah perbezaan utama antara FISH dan CGH.
