Perbezaan utama antara HPLC dan UPLC ialah HPLC membenarkan analisis zarah yang mempunyai saiz sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membenarkan zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
HPLC dan UPLC ialah kedua-dua teknik Kromatografi Cecair yang berguna dalam mengasingkan komponen sebatian. Untuk mengetahui perbezaan antara HPLC dan UPLC, terlebih dahulu kita perlu mengetahui apa itu HPLC. Ini kerana UPLC ialah versi khas HPLC dan kita boleh memahaminya dengan mudah jika kita tahu apa itu HPLC.
Apakah itu HPLC?
Istilah HPLC ialah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. Ia adalah teknik yang boleh kita gunakan untuk mengasingkan juzuk yang berbeza bagi sebatian. Juga, ia adalah teknik yang paling banyak digunakan untuk mengenal pasti, mengukur dan mengasingkan komponen campuran. Selain itu, teknik ini menggunakan tekanan tinggi untuk menolak pelarut melalui lajur. Tambahan pula, aplikasi utama HPLC adalah dalam biokimia untuk analisis juzuk sebatian. Ia merupakan cara yang ideal untuk pengasingan dan pengenalpastian asid amino, asid nukleik, protein, hidrokarbon, racun perosak, karbohidrat, antibiotik, steroid dan banyak lagi bahan tak organik yang lain.
Rajah 01: Sistem HPLC dalam Makmal
Secara ringkasnya, kaedah pengendalian teknik HPLC adalah seperti berikut. Pertama, kita harus memperkenalkan sampel ke dalam aliran fasa mudah alih dalam jumlah kecil diskret menggunakan pam. Tekanan pam hendaklah dikekalkan pada 40 MPa. Kemudian, aliran fasa mudah alih ini meresap melalui lajur HPLC. Juga, komponen dalam sampel melalui lajur. Namun, kelajuan pergerakan mereka berbeza antara satu sama lain. Perbezaan ini timbul disebabkan oleh perbezaan interaksi antara komponen sampel dan penjerap di dalam lajur. Kami memanggil penjerap ini sebagai fasa pegun kerana ia berada di dalam lajur (tidak bergerak). Kedua, di penghujung lajur, kita boleh mengumpul sampel yang tersingkir daripada lajur. Di sana kita boleh menentukan perbezaan masa pengekalan untuk setiap komponen dalam sampel.
Apakah itu UPLC?
Istilah UPLC ialah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi Ultra. Ia adalah variasi HPLC, tetapi kaedah operasi adalah sama. Walau bagaimanapun, tidak seperti HPLC, kaedah ini membenarkan zarah yang sangat kecil untuk dianalisis, seperti zarah kecil 2 mikrometer.
Rajah 02: Peranti UPLC
Selain itu, ia menyediakan analisis yang lebih pantas. Dalam teknik ini, kami menggunakan tekanan pam 100 MPa untuk memasukkan sampel ke dalam lajur. Oleh itu, tekanan tinggi ini mengesahkan bahawa keseluruhan sampel dimasukkan ke dalam lajur. Oleh itu, ini sangat cekap berbanding HPLC.
Apakah Perbezaan Antara HPLC dan UPLC?
Istilah HPLC ialah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi manakala istilah UPLC ialah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. Oleh itu, teknik UPLC adalah versi HPLC yang dibangunkan. Oleh itu, kaedah operasi adalah sama untuk kedua-dua teknik. Bagaimanapun, UPLC lebih cekap berbanding HPLC kerana ia menggunakan tekanan pam yang tinggi; tekanan pam untuk HPLC ialah 40 MPA manakala ia adalah 100 MPa untuk UPLC. Oleh itu, ini adalah perbezaan antara HPLC dan UPLC. Di atas semua itu, perbezaan utama antara HPLC dan UPLC ialah HPLC membenarkan analisis zarah yang mempunyai saiz sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membenarkan zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
Ringkasan – HPLC lwn UPLC
UPLC ialah satu bentuk HPLC. Oleh itu, kaedah operasi adalah sama. Tetapi, kita boleh menemui beberapa ciri yang dipertingkatkan dalam UPLC berbanding HPLC. Oleh itu, terdapat beberapa perbezaan antara HPLC dan UPLC. Walau bagaimanapun, perbezaan utama antara HPLC dan UPLC ialah HPLC membenarkan analisis zarah yang mempunyai saiz sekitar 5 mikrometer manakala UPLC membenarkan zarah yang lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
