Perbezaan Utama – Primer Hadapan vs Songsang
Tindak balas rantai polimerase (PCR) ialah kaedah penguatan DNA yang digunakan dalam aplikasi Biologi Molekul. Ia adalah teknik yang biasa digunakan yang menghasilkan berjuta-juta hingga berbilion salinan urutan DNA yang sangat berminat. Ia adalah kaedah in vitro yang dilakukan di makmal. Teknik PCR bergantung sepenuhnya kepada polimerase DNA yang dihasilkan secara komersial yang dipanggil Taq polymerase. Dan juga ia memerlukan beberapa komponen lain dan penyelenggaraan suhu yang betul. Satu komponen penting ialah primer. Primer ialah jujukan DNA pendek yang direka khusus untuk jujukan DNA sasaran. Panjangnya biasanya sekitar 20 nukleotida. Taq polimerase memangkinkan penambahan nukleotida ke dalam jujukan nukleotida sedia ada. Oleh itu, primer berfungsi sebagai titik permulaan sintesis helai baru. Taq polimerase hanya berfungsi dalam arah 5' hingga 3' maka sintesis DNA berlaku dalam arah 5' hingga 3' yang sama. Oleh kerana DNA terkandas dua kali, dua jenis primer diperlukan dalam PCR. Mereka dikenali sebagai primer hadapan dan primer terbalik. Primer hadapan dan belakang diistilahkan berdasarkan arah pemanjangan primer dalam DNA apabila sintesis DNA berlaku. Penyepuhlindapan primer ke hadapan dengan untaian DNA antisens dan memulakan sintesis untaian +ve gen ke arah 5’ hingga 3’. Anil primer terbalik dengan untaian deria dan memulakan sintesis untaian pelengkap untaian pengekodan; iaitu –vekan untaian gen ke arah 5’hingga 3’. Ini ialah perbezaan utama antara primer hadapan dan belakang.
Apakah itu Primer Hadapan?
Orientasi ke hadapan ialah sintesis untaian pengekodan atau untaian deria gen. Taq polimerase memangkinkan sintesis untaian baru dalam arah 5’ hingga 3’. Sintesis untaian pengekodan berlaku apabila primer menyelinap dengan bukan pengekodan atau untaian antisense dan memanjang dalam arah 5’ hingga 3’.
Rajah 01: Primer Hadapan dan Songsang
Aprimer yang disepuh dengan helai antisense atau helai bukan pengekodan atau helai templat dikenali sebagai primer ke hadapan kerana primer ke hadapan bertindak sebagai titik permulaan kepada sintesis pengekodan atau helai positif gen. Primer hadapan mempunyai jujukan nukleotida pendek yang merupakan pelengkap kepada hujung mengapit 3’ helai antisense. Ia berhibrid dengan helai antisense dan memudahkan polimerase Taq untuk menambah nukleotida yang menjadi pelengkap kepada helai templat.
Apakah itu Primer Songsang?
April terbalik ialah jujukan DNA pendek yang disepuh dengan hujung 3’ untai deria atau untaian pengekodan. Primer terbalik berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis untaian pelengkap bagi urutan pengekodan atau urutan bukan pengekodan. Primer terbalik direka bentuk sebagai pelengkap kepada hujung 3’ untaian pengekodan. Oleh itu, ia menyelinap dengan hujung 3' diapit helai pengekodan dan membolehkan polimerase Taq mensintesis helai antisense atau helai templat. Oleh kerana orientasinya adalah dalam cara terbalik, buku asas ini dilabelkan sebagai buku asas terbalik.
Kedua-dua primer terbalik dan hadapan adalah penting untuk pengeluaran berjuta-juta hingga berbilion salinan kawasan tertentu DNA yang disasarkan atau berminat.
Apakah Persamaan Antara Primer Hadapan dan Songsang?
- Kedua-dua primer Hadapan dan Songsang diperbuat daripada oligonukleotida.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang mempunyai jujukan nukleotida pendek yang melengkapi hujung mengapit helai ganda DNA.
- Kedua-dua primer Hadapan dan Songsang biasanya terdiri daripada 20 nukleotida.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang digunakan dalam tindak balas rantai polimerase.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang disintesis secara komersial.
- Kedua-dua primer Hadapan dan Songsang adalah suhu yang stabil dan ia biasanya mempunyai Tm yang serupa.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang disepuhlindap dengan urutan DNA sasaran.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang direka bentuk mengikut tindak balas PCR.
- Kedua-dua Primer Hadapan dan Songsang dihidangkan sebagai titik permulaan untuk penguatan DNA.
- Kedua-dua primer terbalik dan hadapan adalah penting untuk pengeluaran jutaan salinan kawasan tertentu bagi jujukan DNA yang disasarkan atau berminat.
Apakah Perbezaan Antara Primer Hadapan dan Songsang?
Prime hadapan lwn Primer Songsang |
|
| April ke hadapan ialah jujukan DNA pendek yang berhibrid dengan hujung 3’ bukan pengekodan atau untaian templat gen dan berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis jujukan pengekodan. | April terbalik ialah jujukan DNA pendek yang berhibrid dengan hujung 3’ pengekodan atau helai bukan templat dan berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis jujukan bukan pengekodan. |
| Helai Penyepuhlindapan | |
| Majukan anil primer dengan helai templat. | Sepuh primer terbalikkan dengan helai bukan templat. |
| Jujukan Baharu yang Terhasil | |
| April ke hadapan memudahkan sintesis urutan pengekodan. | April terbalik memudahkan sintesis urutan bukan pengekodan. |
Ringkasan – Primer Hadapan vs Songsang
Terdapat dua jenis primer yang terlibat dalam teknik PCR. Ia adalah primer hadapan dan belakang. Berdasarkan pemanjangan primer dalam sintesis untai DNA baharu, primer ini dilabel atau dinamakan. Taq polymerase mensintesis DNA baharu dalam orientasi 5’ hingga 3’. Oleh itu, primer direka bentuk sebagai pelengkap kepada hujung 3' untaian berganda. Primer hadapan yang memanjang dalam arah 5’ hingga 3’ berhibrid dengan hujung 3’ antisense atau templat atau jujukan bukan pengekodan. Ia berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis urutan pengekodan. Primer terbalik yang memanjang dalam arah 5’ hingga 3’ berhibrid dengan hujung 3’ pengekodan atau bukan templat atau untaian deria. Ia berfungsi sebagai titik permulaan untuk mensintesis urutan bukan pengekodan. Ini ialah perbezaan antara primer hadapan dan belakang.
