Perbezaan Utama – Transfeksi Sementara vs Stabil
Transfeksi ialah proses yang terlibat dalam pemindahan gen sel eukariotik menggunakan kaedah kimia atau fizikal. Transfeksi boleh dikelaskan kepada dua jenis utama yang dinamakan transfeksi sementara dan transfeksi stabil. Semasa pemindahan sementara, gen yang diminati gagal untuk berintegrasi dengan genom perumah dan dinyatakan secara sementara dalam perumah untuk jangka pendek manakala, dalam pemindahan yang stabil, gen yang diminati berintegrasi dengan genom perumah dan dikekalkan untuk jangka panjang dalam beberapa generasi.. Ini adalah perbezaan utama antara transfeksi sementara dan stabil. Dalam kedua-dua kes, pemindahan berjaya dan gen dinyatakan.
Apakah Transfeksi Sementara?
Transfection ialah alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara dua jenis pemindahan, pemindahan sementara adalah cara biasa dalam pemindahan gen. Melalui vektor, gen asing diubah di dalam sel perumah. Sebaik sahaja DNA asing memasuki sel perumah, ia mempunyai dua pilihan. Ia boleh sama ada berintegrasi dengan genom perumah dan mereplikasi, atau kekal di dalam tanpa menyepadukan ke dalam genom. Transfeksi sementara mempamerkan ekspresi sementara gen yang dimasukkan tanpa disepadukan ke dalam genom perumah. Gen mengekspresikan dan menghasilkan protein berkod sehingga sel membelah. Walau bagaimanapun, disebabkan ketidakupayaan integrasi, ia tidak boleh mereplikasi dan memasuki generasi akan datang. Jenis pemindahan ini berjaya untuk tempoh masa yang singkat. Semasa pembahagian sel atau disebabkan beberapa faktor lain, DNA asing tertakluk kepada degradasi. Transfeksi sementara ditunjukkan apabila DNA asing dalam bentuk DNA bergelung tinggi.
Rajah 01: Transfeksi Sementara
Apakah itu Transfeksi Stabil?
Transfeksi stabil menunjukkan integrasi gen asing yang berjaya ke dalam genom perumah. Sebaik sahaja DNA asing masuk ke dalam sel perumah, sebahagian daripada DNA asing bergabung dengan genom perumah dan menjadi sebahagian daripadanya. Oleh itu, DNA asing juga mereplikasi dan berpindah ke generasi akan datang apabila genom perumah mereplikasi. Jenis pemindahan ini adalah kompleks dan jarang berlaku. Walau bagaimanapun, disebabkan pemindahan yang stabil ke dalam genom, sifat ini dikekalkan untuk tempoh yang lebih lama dalam beberapa generasi.
Transfeksi yang stabil ialah proses yang sukar dan memerlukan penghantaran DNA yang berkesan dan pemerolehan sel DNA asing ke dalam genomnya. Oleh itu, DNA linear lebih mengutamakan transfeksi yang stabil daripada DNA bulat. Walau bagaimanapun, kadar pemindahan yang stabil adalah lebih kurang satu dalam 104 sel yang diubah. Transfeksi yang stabil boleh diperhatikan melalui cotransfomation penanda yang boleh dipilih dan melakukan pemilihan buatan pada medium.
Rajah 02: Transfeksi Stabil
Apakah perbezaan antara Transfeksi Sementara dan Stabil?
Transience vs Stabil Transfection |
|
| DNA asing tidak berintegrasi ke dalam genom perumah. | DNA asing berintegrasi dengan genom perumah dan menjadi sebahagian daripadanya. |
| Replikasi dalam Hos | |
| Gen yang ditransfeksi secara sementara tidak mereplikasi dalam hos. Oleh itu gen tidak diturunkan kepada generasi seterusnya. | Gen direplikasi dalam hos dan diteruskan kepada generasi akan datang. |
| Tempoh masa Ekspresi Gen | |
| Gen dinyatakan untuk tempoh masa yang terhad dan selepas itu, ia dimusnahkan. | Gen menjadi sebahagian daripada genom dan diekspresikan dalam generasi untuk tempoh masa yang lama. |
| Gunakan | |
| Ini berguna untuk mengkaji kesan ekspresi jangka pendek gen atau produk gen. | Ini berguna untuk mengkaji kesan ekspresi gen jangka panjang. |
| Pengesanan Transfeksi | |
| Gen dinyatakan dan boleh dikesan dengan mudah dengan memasukkan gen pelapor. | Transfeksi stabil boleh dikesan dengan mudah dengan memasukkan penanda yang boleh dipilih dan memilih melalui pemilihan buatan pada media. |
| Kejadian dan Proses | |
| Transfeksi sementara adalah perkara biasa dan tidak rumit untuk dilakukan. | Transfeksi stabil jarang berlaku dan rumit untuk dilakukan. |
| Sifat DNA | |
| DNA bergelung tinggi sangat sesuai untuk pemindahan sementara. | DNA linear sesuai untuk pemindahan yang stabil. |
| Aplikasi | |
| Ini digunakan untuk kajian kejatuhan gen atau pembungkaman dengan RNA yang menghalang, pengeluaran protein dalam skala kecil | Ini digunakan untuk penghasilan protein dalam kajian farmakologi berskala besar, jangka panjang, terapi gen, penyelidikan mengenai mekanisme pengawalan genetik jangka panjang |
Ringkasan – Transfeksi Sementara vs Stabil
Transfeksi sementara dan stabil ialah dua jenis pemindahan yang ditunjukkan semasa gen dipindahkan ke dalam sel eukariotik oleh sistem berasaskan bukan virus. DNA asing yang diubah tidak disepadukan dengan genom perumah dalam transfeksi sementara manakala ia berintegrasi dengan genom perumah dalam pemindahan yang stabil. DNA bergelung bulat ditunjukkan transfeksi sementara manakala DNA linear lebih suka transfeksi stabil. Ini adalah perbezaan antara transfeksi sementara dan stabil. Walau bagaimanapun pemindahan sementara adalah lebih biasa dan mudah berbanding dengan pemindahan yang stabil. Tetapi pemilihan satu antara dua bergantung pada tujuan pemindahan gen dan tempoh projek penyelidikan.
