Transformasi lwn Transfeksi
Transformasi dan pemindahan ialah dua teknik mudah yang digunakan untuk memperkenalkan gen asing ke dalam sel perumah. Walau bagaimanapun, teknik ini bergantung pada jenis hos atau sistem vektor.
Apakah itu Transformasi Sel?
Transformasi ialah teknik yang digunakan untuk memperkenalkan gen ke dalam sel yis dan bakteria. Teknik ini biasanya menyebabkan perubahan yang diwarisi dalam gen, dan oleh itu ekspresi gen adalah kekal. Transformasi bakteria pertama kali diperkenalkan pada tahun 1928 oleh Frederick Griffith. Kemudian pada awal 1970-an, teknik ini digunakan dalam E.coli. Semasa proses transformasi E. coli, sel direndam dalam larutan ais sejuk CaCl2 Langkah ini menjadikan sel E.coli kompeten. Selepas itu, sel yang kompeten dicampur dengan DNA plasmid dan diinkubasi di atas ais selama 20-30 minit. Kemudian kejutan haba pendek diberikan untuk membolehkan pemindahan DNA ke dalam sel. Akhirnya, sel-sel diletakkan dalam sup nutrien dan diinkubasi pada 37 ° C selama 60-90 minit untuk membentuk plasmid. Setelah langkah-langkah ini berjaya diselesaikan, sel yang diubah boleh diletakkan pada media yang sesuai untuk pembiakan sel. Memandangkan, transformasi dianggap sebagai teknik yang tidak cekap, ia mungkin tidak digunakan untuk penyediaan bank klon.
Apakah itu Pemindahan Sel?
Transfeksi ialah kaedah pengenalan gen asing, biasanya, ke dalam sel mamalia. Terdapat dua kaedah pemindahan; iaitu transfeksi sementara dan transfeksi stabil. Dalam transfeksi sementara, ekspresi gen tersedia untuk masa yang terhad; oleh itu, perubahan gen menyebabkan ekspresi sementara. Kaedah pemindahan ini adalah mudah dan cepat; oleh itu ia boleh digunakan secara rutin. Satu kelemahan transfeksi sementara ialah kesukaran untuk memohon sistem sintesis protein berskala besar.
Semasa pemindahan yang stabil, gen sasaran disepadukan ke dalam genom sel perumah, dan oleh itu ekspresi gen adalah kekal, tidak seperti pemindahan sementara.
Apakah perbezaan antara Transformasi dan Transfeksi?
• Transformasi ialah pengenalan gen ke dalam sel prokariotik (bakteria dan yis), manakala pemindahan biasanya dipanggil pengenalan gen ke dalam sel mamalia.
• Transformasi menghasilkan perubahan yang boleh diwarisi, dalam gen, manakala pemindahan boleh mengakibatkan sama ada ekspresi sementara atau perubahan kekal dalam gen.
