Perbezaan utama antara yis satu hibrid dan yis dua hibrid ialah yis satu hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA-protein manakala yis dua hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi protein-protein.
Mengkaji interaksi antara molekul selular boleh membantu untuk menentukan tapak pengecaman yang terlibat dalam ekspresi gen dan laluan protein. Interaksi DNA dan protein adalah penting kepada proses selular seperti pengubahsuaian DNA dan peraturan transkrip, dsb. Sebaliknya, interaksi protein dan protein memainkan peranan penting dalam proses selular seperti replikasi, transkripsi, terjemahan dan transduksi isyarat. Oleh itu, adalah sangat penting untuk mengenal pasti interaksi molekul selular ini melalui ujian yang berbeza. Ragi satu hibrid dan ragi dua hibrid ialah dua ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA-protein dan protein-protein.
Apakah Yis One Hybrid?
Yeast one hybrid (Y1H) ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA-protein intraselular. Kaedah ini mula-mula ditubuhkan oleh Wang dan Reed pada tahun 1993. Sejak itu, ia telah menunjukkan kuasa yang lebih besar dalam penyelidikan biologi. Dalam ujian ini, terdapat dua komponen utama: umpan DNA dan mangsa protein.
Rajah 01: Ragi Satu Hibrid
Dalam prosedur, jujukan DNA (umpan DNA) mula-mula diklon di hulu dua wartawan berbeza (HIS3, LacZ). Binaan wartawan ini disepadukan ke dalam genom strain yis. Faktor transkrip diambil sebagai mangsa protein. Faktor transkripsi digabungkan dengan domain pengaktifan transkrip (AD) faktor transkrip Gal4 ragi untuk membuat protein hibrid. Keseluruhan protein hibrid ini disepadukan ke dalam plasmid sebelum memasukkannya ke dalam ketegangan yis. Selepas pengenalan plasmid rekombinan, apabila faktor transkrip berinteraksi dengan serpihan DNA, bahagian AD mengaktifkan ekspresi gen reporter (HIS3or LacZ). Penjujukan plasmid membolehkan pengenalpastian faktor transkrip yang boleh mengikat serpihan DNA. Baru-baru ini, kaedah yis satu hibrid digunakan untuk menyelidik diagnosis penyakit. Oleh itu, pada masa hadapan, ujian ini akan digunakan secara lebih meluas dalam penyelidikan saintifik dan rawatan perubatan.
Apakah Yis Two Hybrid?
Yis two hybrid (Y2H) ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi protein dan protein intraselular. Kaedah ini pada asalnya ditemui oleh Stanley Fields dan Ok-Kyu Song pada tahun 1989. Teknik ini mengesan interaksi protein-protein menggunakan faktor transkripsi Gal4 yis.
Rajah 02: Ragi Dua Hibrid
Dalam kaedah ini, dua gabungan (hibrid) mula-mula dibina menggunakan protein yang diminati: menggabungkan satu protein dengan domain pengikat DNA (DBD) dan dengan menggabungkan protein lain dengan domain pengaktif (AD) faktor transkripsi Gal4. Protein yang bergabung dengan DBD dikenali sebagai umpan manakala, protein yang bergabung dengan AD dikenali sebagai mangsa. Dalam ketegangan yis, apabila interaksi umpan dan mangsa, DBD dan AD dibawa berdekatan untuk menjana faktor transkripsi Gal4 yang berfungsi di hulu gen wartawan. Faktor transkripsi berfungsi mengaktifkan ekspresi gen wartawan. Tambahan pula, kaedah ini kini digunakan untuk menyaring interaksi protein membran integral dalam sel mamalia.
Apakah Persamaan Antara Ragi Satu Hibrid dan Ragi Dua Hibrid?
- Ragi satu hibrid dan ragi dua hibrid ialah dua ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA-protein dan protein-protein.
- Ujian ini menggunakan strain yis.
- Kedua-dua ujian menggunakan domain pengaktifan (AD) faktor transkripsi Gal4.
- Mereka menggunakan ekspresi gen wartawan (HIS3, atau LacZ) untuk mengesan interaksi.
- Mereka mempunyai umpan dan mangsa.
- Kedua-dua ujian sangat berguna dalam penyelidikan biologi moden.
Apakah Perbezaan Antara Ragi Satu Hibrid dan Ragi Dua Hibrid?
Ragi satu hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA dan protein manakala yis dua hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi protein dan protein. Oleh itu, ini adalah perbezaan utama antara ragi satu hibrid dan ragi dua hibrid. Tambahan pula, dalam yis satu hibrid, umpan adalah serpihan DNA, dan mangsa adalah molekul protein. Sebaliknya, dalam yis dua hibrid, kedua-dua umpan dan mangsa adalah molekul protein.
Maklumat di bawah menyenaraikan perbezaan antara yis satu hibrid dan yis dua hibrid dalam bentuk jadual untuk perbandingan sebelah menyebelah.
Ringkasan – Yeast One Hybrid vs Yeast Two Hybrid
Ragi satu hibrid dan ragi dua hibrid ialah dua ujian berasaskan in vitro yang penting. Ragi satu hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi DNA dan protein manakala yis dua hibrid ialah ujian berasaskan in vitro untuk menganalisis interaksi protein dan protein. Oleh itu, ini ialah perbezaan utama antara yis satu hibrid dan yis dua hibrid.
