Perbezaan utama antara Elisa dan Elispot ialah Elisa ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein isyarat yang dirembes, manakala Elispot ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang mengesan sel perembesan sitokin individu.
Elisa dan Elispot ialah dua ujian imunosorben berkaitan enzim yang digunakan secara meluas dalam perubatan, patologi tumbuhan, bioteknologi dan industri farmaseutikal yang berbeza. Dalam teknik ini, analit protein dikesan oleh antibodi yang diarahkan menentangnya. Elisa ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang paling popular digunakan di makmal. Sebaliknya, Elispot ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang tidak digunakan sebagai ganti Elisa tetapi digunakan sebagai tambahan kepada Elisa di makmal.
Apakah Elisa Assay?
Elisa ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein isyarat yang dirembes. Ia adalah ujian biokimia analitik yang digunakan secara meluas yang pertama kali diterangkan oleh Engvall dan Perlmann pada tahun 1971. Teknik ini menggunakan jenis fasa pepejal enzim immunoassay untuk mengesan kehadiran protein tertentu dalam sampel cecair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap protein khusus ini. Ujian ini ialah alat diagnostik yang biasa digunakan dalam perubatan, patologi tumbuhan dan bioteknologi.
Mekanisme Ujian ELISA
Dalam kebanyakan ujian ELISA, jumlah antigen yang tidak diketahui digerakkan pada sokongan pepejal (plat mikroliter) pada permulaannya. Kemudian antibodi primer yang sepadan digunakan di atas permukaan sokongan pepejal. Antibodi ini membentuk kompleks dengan antigen (kompleks antigen-antibodi). Antibodi primer terikat antigen boleh dikesan oleh antibodi sekunder yang dikaitkan dengan enzim melalui biokonjugasi. Dalam langkah terakhir ujian Elisa, bahan yang mengandungi substrat enzim ditambah. Jika terdapat pengikatan antibodi primer yang betul kepada antigen, perubahan warna yang dapat dikesan dihasilkan oleh substrat. Akhirnya, ini mengukur antigen dalam sampel.
Rajah 01: Pelbagai Jenis Elisa
Selain itu, terdapat pendekatan yang berbeza untuk Elisa, seperti Elisa langsung dan Elisa tidak langsung. Pada masa ini, pelbagai ujian Elisa digunakan untuk mengesan patogen manusia seperti Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus hepatitis B, virus hepatitis C, enterotoksin yang menghasilkan E.coli, HIV dan SARS-CoV-2.
Apakah Elispot Assay?
Elispot ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang mengesan sel perembesan sitokin individu. Cecil Czerkinsky pertama kali menggambarkan ELISpot pada tahun 1983. Ia adalah sejenis ujian yang memberi tumpuan kepada mengukur secara kuantitatif kekerapan rembesan sitokin untuk satu sel. Ia juga dikelaskan sebagai teknik yang menggunakan antibodi untuk mengesan analit protein biologi atau kimia. Ujian Fluorospot ialah variasi ujian Elispot, yang menggunakan pendarfluor untuk menganalisis berbilang analit (lebih banyak protein rahsia).
Mekanisme Ujian Elispot
Dalam mekanisme ini, antibodi monoklonal khusus sitokin ditambahkan pada telaga plat mikroliter pada mulanya. Kemudian sel-sel yang dikehendaki yang diperhatikan ditambah ke telaga. Kemudian, sel-sel itu diinkubasi. Semasa pengeraman sel, sel dibenarkan bertindak balas terhadap sebarang rangsangan dan merembeskan sitokin. Sitokin yang telah dirembeskan oleh sel yang diinkubasi akan melekat pada antibodi kerana sel dikelilingi oleh antibodi monoklonal khusus sitokin.
Rajah 02: Elispot Assay
Untuk mengesan antibodi monoklonal khusus sitokin ini, antibodi pengesanan khusus terbiotinilasi ditambahkan pada telaga. Antibodi pengesanan spesifik biotinilasi menangkap antibodi monoklonal khusus sitokin dalam telaga. Selain itu, konjugat streptavidin-enzim ditambah ke dalam telaga untuk mengikat dengan antibodi pengesanan. Pada langkah terakhir, substrat khusus ditambahkan ke telaga. Tindak balas konjugat enzim dan substrat menghasilkan bintik-bintik yang berbeza di dalam telaga. Tempat yang berbeza ini dibaca pada pembaca ELISpot automatik. Akhirnya, ini akan mengira lagi kekerapan rembesan sitokin.
Apakah Persamaan Antara Elisa dan Elispot?
- Kedua-duanya ialah ujian imunosorben berkaitan enzim.
- Kedua-dua ujian mengesan analit protein tertentu.
- Ujian ini menggunakan antibodi khusus untuk mengenal pasti analit protein.
- Kedua-dua ujian menggunakan enzim dan substrat.
- Ia digunakan sebagai alat diagnostik dalam makmal perubatan.
Apakah Perbezaan Antara Elisa dan Elispot?
Elisa ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang menentukan jumlah kepekatan protein isyarat yang dirembes. Sebaliknya, Elispot ialah ujian imunosorben berkaitan enzim yang mengukur sel rembesan sitokin individu. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara Elisa dan Elispot. Selain itu, dalam ujian Elisa, antigen mula-mula dialihkan ke telaga mikroliter. Sebaliknya, dalam ujian Elispot, antibodi mula-mula dialihkan ke telaga mikroliter. Oleh itu, ini adalah satu lagi perbezaan antara Elisa dan Elispot.
Maklumat di bawah membentangkan analisis terperinci tentang perbezaan antara Elisa dan Elispot dalam bentuk jadual.
Ringkasan – Elisa lwn Elispot
Elisa dan Elispot ialah dua ujian imunosorben berkaitan enzim yang digunakan secara meluas dalam perubatan, patologi tumbuhan, bioteknologi dan industri farmaseutikal yang berbeza. Elisa mengesan kehadiran ligan (protein) dalam sampel cecair menggunakan antibodi yang diarahkan terhadap ligan yang akan diukur. Ujian Elispot ialah kaedah yang digunakan secara meluas untuk memantau tindak balas imun. Ia mengesan sel rembesan sitokin individu menggunakan antibodi. Ia adalah teknik immunoassay dan bioassay. Oleh itu, ini ialah ringkasan perbezaan antara Elisa dan Elispot.
