Perbezaan utama antara RIA dan ELISA ialah radioimmunoassay (RIA) ialah teknik immunoassay yang menggunakan radioisotop untuk mengesan kompleks antigen-antibodi manakala enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) ialah teknik immunoassay yang menggunakan enzim untuk mengesan antigen -kompleks antibodi.
Pengesanan protein khusus seperti antigen adalah sangat penting dalam diagnosis penyakit. Oleh itu, RIA dan ELISA adalah dua teknik immunoassay yang digunakan dalam makmal untuk mengesan protein tertentu dengan cepat, terutamanya antigen. Secara amnya, antibodi tertentu mengikat antigen sasaran dan membentuk kompleks yang boleh dilihat dikenali sebagai precipitin. Kompleks antibodi dan antigen ini boleh dikenal pasti melalui teknik yang berbeza. Teknik mengesan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop dikenali sebagai RIA, dan teknik mengesan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim dikenali sebagai ELISA.
Apakah itu RIA?
Radioimmunoassay (RIA) ialah teknik immunoassay yang mengesan kompleks antigen dan antibodi menggunakan radioisotop. Rosalyn Sussman Yalow mengembangkan teknik ini pada tahun 1960 dengan bantuan Solomon Berson. Untuk penemuan yang luar biasa ini, Rosalyn Sussman Yalow memenangi Hadiah Nobel untuk perubatan pada tahun 1977. Biasanya, dalam radioimmunoassay, kuantiti antigen yang diketahui pertama kali dibuat radioaktif Teknik ini kerap menggunakan isotop radioaktif gamma iodin, dipanggil 125-I, untuk melabel antigen. Radioisotop ini biasanya melekat pada asid amino tyrosine antigen. Kemudian antigen berlabel radio bercampur dengan antibodi. Akibatnya, antigen dan antibodi berlabel radio secara khusus mengikat satu sama lain.
Kemudian, sampel serum yang mengandungi kuantiti yang tidak diketahui antigen yang sama ditambah. Ini menyebabkan antigen tidak berlabel daripada serum bersaing dengan antigen berlabel radio untuk tapak pengikat antibodi. Apabila kepekatan antigen tidak berlabel meningkat, lebih banyak daripadanya mengikat kepada antibodi, menggantikan varian berlabel radio. Oleh itu, ia mengurangkan nisbah antigen berlabel radio terikat antibodi kepada antigen berlabel radio bebas. Pada akhir prosedur, antigen terikat dipisahkan. Akhirnya, keradioaktifan antigen bebas dalam supernatan yang tinggal diukur menggunakan pembilang gamma.
Apakah ELISA?
ELISA ialah teknik immunoassay yang mengesan kompleks antigen dan antibodi dengan menggunakan enzim. Ia adalah ujian analitik biokimia yang pertama kali diterangkan oleh Engvall dan Perlmann pada tahun 1971. Dalam kebanyakan bentuk teknik ELISA yang mudah, antigen sampel pesakit dilekatkan pada permukaan pepejal. Kemudian antibodi yang sepadan digunakan di atas permukaan, supaya ia boleh mengikat antigen.
Rajah 01: ELISA
Antibodi khusus ini dikaitkan dengan enzim. Kemudian, sebarang antibodi yang tidak terikat dikeluarkan dengan mencuci dengan detergen. Pada langkah terakhir teknik ini, substrat enzim ditambah. Jika terdapat pengikatan antigen dan antibodi yang betul, tindak balas seterusnya menghasilkan isyarat warna yang boleh dikesan, selalunya perubahan warna.
Apakah Persamaan Antara RIA dan ELISA?
- RIA dan ELISA ialah teknik immunoassay.
- Kedua-dua teknik mempunyai pembentukan kompleks antigen dan antibodi.
- Teknik ini boleh digunakan untuk mengesan protein yang tidak diketahui dalam sampel.
- Kedua-duanya digunakan dalam diagnosis penyakit di makmal.
- Kedua-duanya adalah teknik yang sangat spesifik dan sensitif.
Apakah Perbezaan Antara RIA dan ELISA?
RIA ialah teknik immunoassay untuk pengesanan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop. ELISA ialah teknik immunoassay untuk pengesanan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim. Jadi, inilah perbezaan utama antara RIA dan ELISA. Selain itu, dalam teknik RIA, antigen dilabelkan, tetapi dalam ELISA, antibodi dilabelkan. Tambahan pula, dalam teknik RIA, molekul pelabelan adalah radioisotop, manakala, dalam ELISA, molekul pelabelan adalah enzim. Oleh itu, ini adalah satu lagi perbezaan antara RIA dan ELISA.
Maklumat di bawah menunjukkan lebih banyak perbezaan antara RIA dan ELISA dalam bentuk jadual.
Ringkasan – RIA lwn ELISA
Immunoassays memainkan peranan yang sangat penting dalam pelbagai tetapan bioanalisis, seperti diagnostik klinikal, analisis biofarmaseutikal, pemantauan alam sekitar, biosekuriti dan ujian makanan. Sejak tahun 1960-an, pelbagai jenis immunoassay telah dibangunkan. RIA dan ELISA adalah kedua-dua teknik immunoassay. RIA ialah teknik immunoassay untuk mengesan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop. ELISA ialah teknik immunoassay untuk mengesan kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim. Oleh itu, ini ialah ringkasan perbezaan antara RIA dan ELISA.
