Perbezaan utama antara kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa ialah dalam ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa, kecerunan sukrosa berterusan digunakan, manakala dalam ultrasentrifugasi kusyen sukrosa, kecerunan sukrosa terputus digunakan.
Kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa ialah dua jenis teknik serupa yang digunakan untuk mengasingkan jenis makromolekul tertentu. Dalam kedua-dua teknik, kecerunan ketumpatan sukrosa digunakan. Tetapi dalam ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa, kecerunan ketumpatan berterusan digunakan manakala, dalam ultrasentrifugasi kusyen sukrosa, kecerunan ketumpatan tak selanjar digunakan.
Apakah itu Ultrasentrifugasi Gradien Sukrosa?
Sucrose gradient ultracentrifugation ialah teknik yang boleh digunakan untuk memfraksinasi makromolekul seperti DNA, RNA dan protein. Terdapat beberapa langkah dalam teknik ini. Ia adalah penyediaan kecerunan sukrosa, sentrifugasi, pengasingan dan elusi. Penyediaan kecerunan adalah langkah utama dalam teknik ini. Dalam teknik ini, sampel yang mengandungi makromolekul saiz berbeza dilapisi pada permukaan lajur kecerunan sukrosa. Apabila mengempar, makromolekul bersaiz berbeza mendapan melalui lajur kecerunan sukrosa pada kadar yang berbeza. Sedimentasi bergantung kepada beberapa faktor, termasuk daya sentrifugasi, bentuk saiz dan ketumpatan makromolekul, ketumpatan dan kelikatan kecerunan. Pada penghujung sentrifugasi, makromolekul dipisahkan secara spatial oleh ketumpatan. Sedimen makromolekul yang lebih besar (makromolekul berketumpatan tinggi) ke bahagian bawah. Yang lebih ringan (makromolekul berketumpatan rendah) kekal di bahagian atas kecerunan. Oleh itu, molekul-molekul terpisah sebagai jalur yang berbeza. Kemudian jalur harus diasingkan, dan penulenan makromolekul khusus daripada sukrosa perlu dilakukan.
Rajah 01: Ultrasentrifugasi Gradien Sukrosa
Di bahagian aplikasi, kaedah ini digunakan secara meluas untuk pembahagian molekul DNA. Ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa biasanya digunakan untuk mencirikan saiz dan komposisi kompleks protein. Selain itu, teknik ini digunakan untuk penulenan separa mRNA.
Apakah itu Sucrose Cushion Ultracentrifugation?
Sucrose cushion ultracentrifugation ialah satu lagi teknik yang membolehkan pembahagian makromolekul. Tidak seperti ultrasentrifugasi kecerunan ketumpatan sukrosa, ultrasentrifugasi kusyen sukrosa menggunakan kecerunan ketumpatan tak selanjar. Kepekatan sukrosa meningkat dari atas ke bawah dalam langkah-langkah diskret. Dalam teknik ini, pengasingan dicapai dengan meletakkan ekstrak yang telah dijelaskan di atas isipadu kecil larutan sukrosa dalam tiub emparan, yang dipanggil kusyen sukrosa. Ini membolehkan pemisahan yang lebih baik dalam sentrifugasi berkelajuan tinggi. Apabila molekul terpisah sebagai jalur antara kusyen sukrosa, jalur putih boleh dikumpulkan dan disucikan. Selain itu, kekotoran boleh disingkirkan lagi menggunakan kaedah kusyen sukrosa. Kaedah kusyen sukrosa membolehkan 60-70% tiub diisi dengan sampel. Oleh itu, kaedah kusyen sukrosa membolehkan jumlah sampel yang lebih besar diproses.
Apakah Persamaan Antara Kecerunan Sukrosa dan Ultrasentrifugasi Kusyen Sukrosa?
- Kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa ialah dua teknik yang digunakan untuk memisahkan campuran makromolekul.
- Dalam kedua-dua kaedah, kecerunan sukrosa digunakan.
- Pesentrifugasi ialah satu langkah dalam kedua-dua kaedah.
- Molekul sedimen sebagai jalur atau zon dalam setiap kaedah.
Apakah Perbezaan Antara Kecerunan Sukrosa dan Ultrasentrifugasi Kusyen Sukrosa?
Sucrose gradient ultracentrifugation ialah teknik yang menggunakan kecerunan sukrosa berterusan dalam tiub emparan manakala ultrasentrifugasi kusyen sukrosa ialah teknik yang menggunakan kecerunan sukrosa terputus. Oleh itu, ini ialah perbezaan utama antara kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa.
Selain itu, ultrasentrifugasi kusyen sukrosa membolehkan jumlah sampel yang lebih besar diproses manakala ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa membolehkan jumlah sampel yang agak rendah untuk diproses.
Di bawah maklumat grafik menjadualkan lebih banyak perbezaan antara kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa.
Ringkasan – Kecerunan Sukrosa vs Kusyen Sukrosa Ultrasentrifugasi
ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa mengasingkan makromolekul menggunakan kecerunan sukrosa berterusan. Sebaliknya, ultrasentrifugasi kusyen sukrosa menggunakan kecerunan sukrosa terputus untuk memisahkan jenis zarah tertentu dalam campuran. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara kecerunan sukrosa dan ultrasentrifugasi kusyen sukrosa. Kaedah kusyen sukrosa membolehkan pengumpulan zarah utuh secara morfologi kerana ia tidak menyebabkan tekanan mekanikal, tidak seperti ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa, yang menghancurkan molekul ke bahagian bawah tiub. Selain itu, ultrasentrifugasi kusyen sukrosa membolehkan jumlah sampel yang lebih besar untuk diproses daripada ultrasentrifugasi kecerunan sukrosa.
