Perbezaan utama antara serpihan Klenow dan polimerase DNA 1 ialah serpihan Klenow ialah sebahagian besar polimerase DNA 1 yang tidak mempunyai aktiviti eksonuklease 5' hingga 3' manakala polimerase DNA ialah enzim E. coli yang mempunyai ketiga-tiganya. domain termasuk aktiviti exonuclease 5′ hingga 3′.
DNA polimerase ialah salah satu enzim utama yang terlibat dalam replikasi DNA dalam organisma hidup. Terdapat pelbagai bentuk enzim DNA polimerase yang terdapat dalam eukariota dan prokariot berdasarkan saiz dan bentuk. DNA polimerase 1, 2 dan 3 hanya terdapat dalam organisma prokariotik, dan mereka memainkan peranan yang berbeza dalam replikasi DNA. DNA polimerase 1 mempunyai tiga domain dengan 5' hingga 3' polimerase, 3' hingga 5' aktiviti exonuclease dan 5' hingga 3' aktiviti exonuclease. Serpihan Klenow ialah produk proteolitik DNA polimerase 1. Ia mempunyai 5 hingga 3′ polimerase dan 3′ hingga 5′ aktiviti eksonuklease DNA polimerase 1 utuh, tetapi ia tidak mempunyai aktiviti eksonuklease 5′ hingga 3′.
Apakah itu Fragmen Klenow?
Serpihan Klenow ialah sebahagian besar DNA polimerase 1. Tidak seperti DNA polimerase 1, aktiviti eksonuklease 5′ hingga 3′ tidak dilihat dalam serpihan Klenow kerana ia tidak mempunyai domain eksonuklease hadapan 5′ hingga 3′. Serpihan Klenow dihasilkan dengan mencerna DNA polimerase 1 dengan protease yang dipanggil subtilisin, iaitu enzim yang mencerna protein. Dalam sesetengah aplikasi, aktiviti exonuclease 3′ hingga 5′ serpihan Klenow menjadi tidak diingini. Ia boleh disingkirkan dengan memperkenalkan mutasi dalam gen yang mengekod serpihan Klenow. Enzim yang terhasil yang hanya mempunyai aktiviti polimerase 5′ hingga 3′ dikenali sebagai serpihan exo-Klenow. Dari segi morfologi, serpihan Klenow menyerupai tangan kanan manusia. Ia mempunyai domain N-terminal 3′-5′ exonuclease dan domain C-terminal polymerase dipisahkan oleh kira-kira 30 A.
Rajah 01: Serpihan Klenow dan Polimerase DNA 1
serpihan Klenow ialah alat penting dalam teknik biologi molekul. Serpihan Klenow mempunyai pelbagai kegunaan. Mereka amat penting dalam pengklonan hujung tumpul untuk menghasilkan serpihan tumpul. Serpihan Klenow boleh mengeluarkan 3′ overhang atau mengisi 5′ overhang untuk membentuk hujung tumpul. Selain itu, serpihan Klenow digunakan untuk mensintesis DNA untai dua daripada untaian tunggal. Tambahan pula, ia digunakan untuk menyediakan probe berlabel radioaktif menggunakan aktiviti polimerase DNA bergantung kepada DNA 5’ hingga 3′.
Apakah itu DNA Polimerase 1?
DNA polymerase 1 (Pol 1) ialah enzim yang terdapat dalam prokariot yang diperlukan untuk replikasi DNA bakteria. Ia adalah jenis polimerase DNA pertama yang ditemui oleh Arthur Kornberg pada tahun 1956. Pol 1 ialah polimerase paling banyak dalam E. coli. Ia dikodkan oleh gen polA dan terdiri daripada 928 asid amino. Ia terdiri daripada tiga domain. Ketiga-tiga domain memenuhi fungsi yang berbeza. Dua domain menjalankan aktiviti exonuclease 5′ hingga 3′ dan aktiviti exonuclease 3′ hingga 5′. Disebabkan aktiviti yang dimiliki oleh Pol 1 ini, ia popular sebagai enzim pembaikan DNA dan bukannya enzim replikasi DNA. Domain ketiga mempunyai keupayaan untuk memangkinkan berbilang pempolimeran (5′ hingga 3′) sebelum pelepasan DNA templat dan menyambungkan serpihan Okazaki bersama-sama dengan mengisi DNA baharu dan mengeluarkan primer RNA.
Rajah 02: DNA Polimerase
Pol 1 yang diasingkan daripada E Coli digunakan secara meluas dalam aplikasi molekul. Bagaimanapun, sebaik sahaja Taq Polymerase ditemui, ia menggantikan E Coli Pol 1 dalam teknologi PCR. Taq polymerase ialah sejenis polimerase DNA termostabil yang dimiliki oleh Pol 1.
Apakah Persamaan Antara Fragmen Klenow dan DNA Polimerase 1?
- Serpihan Klenow ialah sebahagian besar DNA polimerase 1.
- Ia mempunyai aktiviti polimerase DNA bergantung kepada DNA 5’hingga 3′ dan aktiviti exonuclease 3’hingga 5′ yang menjadi pengantara pembacaan pruf.
- Ia digunakan untuk pelbagai tujuan.
Apakah Perbezaan Antara Fragmen Klenow dan DNA Polimerase 1?
Perbezaan utama antara serpihan Klenow dan polimerase DNA 1 ialah serpihan Klenow tidak mempunyai aktiviti eksonuklease 5' hingga 3' manakala polimerase DNA 1 mempunyai aktiviti eksonuklease 5' hingga 3'. Oleh itu, serpihan Klenow mempunyai dua domain, manakala polimerase DNA 1 mempunyai ketiga-tiga domain.
Di bawah maklumat grafik menunjukkan lebih banyak butiran tentang perbezaan antara serpihan Klenow dan DNA polimerase 1.
Ringkasan – Serpihan Klenow lwn Polimerase DNA 1
DNA polimerase 1 ialah enzim E. coli yang mempunyai tiga domain sebagai domain pempolimeran 5′ hingga 3′, domain eksonuklease 3′ hingga 5′ dan domain eksonuklease 5′ hingga 3′. Serpihan Klenow ialah sebahagian besar polimerase DNA. Ia tidak mempunyai satu domain DNA polimerase 1, iaitu domain exonuclease 5′ hingga 3′. Perbezaan utama antara serpihan Klenow dan polimerase DNA 1 ialah serpihan Klenow tidak mempunyai domain exonuclease 5′ hingga 3′ manakala polimerase DNA 1 mempunyai domain exonuclease 5′ hingga 3′.
