Perbezaan Utama – Elektroforesis Gel Mendatar vs Menegak
Elektroforesis gel ialah teknik makmal yang digunakan dalam genetik untuk mengasingkan campuran yang mengandungi DNA, RNA, dan protein lain mengikut cas dan saiz molekul masing-masing. DNA, RNA atau protein yang perlu diasingkan dalam kaedah ini dijalankan melalui gel yang mengandungi liang kecil. Molekul didorong melalui gel oleh medan elektrik. Molekul melalui liang gel, dan kelajuan pergerakan adalah berkadar songsang dengan panjang masing-masing. Oleh itu, molekul dengan saiz molekul yang lebih rendah akan bergerak lebih cepat daripada molekul dengan berat molekul yang lebih tinggi. Medan elektrik dijana oleh perbezaan cas pada dua hujung gel. Satu hujung mengandungi cas positif, dan hujung yang satu lagi mengandungi cas negatif. Oleh kerana molekul DNA dan RNA bercas negatif, ia akan tertarik ke arah hujung gel yang bercas positif. Elektroforesis gel boleh terdiri daripada dua kaedah berbeza: elektroforesis gel mendatar dan elektroforesis gel menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, gel hadir dalam orientasi mendatar dan terendam dalam penampan berjalan berterusan yang terdapat di dalam kotak gel itu sendiri. Dalam elektroforesis gel menegak, sistem penampan berorientasikan menegak dan tidak berterusan dengan dua ruang hadir di bahagian atas dan bahagian bawah dengan katod dan anod, masing-masing. Ini ialah perbezaan utama antara elektroforesis gel mendatar dan menegak.
Apakah itu Elektroforesis Gel Mendatar?
Elektroforesis gel mendatar menggunakan teori asas untuk pemisahan molekul DNA, RNA atau protein mengikut saiz dan cas molekul masing-masing. Dalam teknik ini, gel hadir dalam orientasi mendatar dan terendam dalam penimbal yang berterusan. Gel agarose digunakan untuk memisahkan kotak gel kepada dua petak. Satu hujung kotak gel mengandungi anod manakala hujung satu lagi mengandungi katod. Apabila arus dikenakan, penimbal yang digunakan dalam teknik ini membolehkan penciptaan kecerunan cas. Apabila cas dikenakan, gel cenderung menjadi panas. Penampan juga berfungsi sebagai penyejuk, yang mengekalkan suhu pada tahap optimum. Peredaran semula penimbal berjalan menghalang pembentukan kecerunan pH. Sistem penimbal terputus tidak boleh digunakan dalam elektroforesis gel mendatar kerana dua petak sistem gel disambungkan dengan penimbal berjalan. Akrilamida digunakan semasa elektroforesis gel untuk memisahkan campuran protein.
Rajah 01: Elektroforesis Gel Mendatar
Dalam elektroforesis gel mendatar, akrilamida tidak boleh digunakan kerana kotak gel terdedah kepada oksigen. Oleh kerana kehadiran oksigen, pempolimeran akrilamida dihalang, dan ini mengganggu pembentukan gel. Elektroforesis gel mendatar ialah kaedah mudah yang digunakan dalam pemisahan DNA dan RNA.
Apakah Elektroforesis Gel Menegak?
Teknik elektroforesis gel menegak berfungsi mengikut teori utama elektroforesis gel, tetapi ia dianggap lebih kompleks daripada kaedah elektroforesis gel mendatar. Teknik ini menggunakan penimbal tidak berterusan. Katod terletak di ruang atas, dan anod terletak di ruang bawah. Elektrod yang terdapat dalam setiap petak menyediakan medan elektrik yang diperlukan. Lapisan nipis gel dituangkan di antara dua plat kaca yang dipasang. Oleh itu, bahagian atas gel terendam dalam ruang atas, dan bahagian bawah gel terendam dalam ruang di bahagian bawah. Sebaik sahaja arus digunakan, sebahagian kecil penimbal bergerak ke ruang bawah dari ruang atas melalui gel. Arus yang digunakan dalam teknik ini ialah unit minit.
Rajah 02: Elektroforesis Gel Menegak
Dalam elektroforesis gel menegak, penimbal hanya mengalir melalui gel. Ini membolehkan kawalan tepat kecerunan voltan semasa peringkat pemisahan. Gel akrilamida boleh digunakan kerana petak tidak terdedah kepada oksigen atmosfera. Oleh kerana saiz pori gel akrilamida yang lebih kecil, pemisahan yang tepat boleh dicapai dengan resolusi yang lebih tinggi.
Apakah Persamaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak?
- Kedua-dua sistem berfungsi mengikut teori asas elektroforesis gel.
- Anod dan katod digunakan untuk menyediakan medan elektrik yang diperlukan dalam kedua-dua sistem.
Apakah Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak?
Elektroforesis Gel Mendatar lwn Menegak |
|
| Elektroforesis Gel Mendatar ialah teknik elektroforesis gel di mana gel hadir dalam orientasi mendatar. | Elektroforesis Gel Menegak ialah teknik elektroforesis gel di mana gel berorientasikan menegak. |
| Penimbal | |
| Elektroforesis gel mendatar terdiri daripada penimbal berterusan. | Penimbal berjalan tidak berterusan dalam elektroforesis gel menegak. |
| Penggunaan Akrilamida | |
| Akrilamida tidak boleh digunakan untuk elektroforesis gel mendatar kerana kotak gel terdedah kepada oksigen atmosfera. | Memandangkan gel tidak terdedah kepada oksigen atmosfera disebabkan oleh dua ruang yang berasingan, akrilamida boleh digunakan untuk elektroforesis gel menegak. |
| Fungsi | |
| Elektroforesis gel mendatar lebih kerap digunakan untuk pengasingan campuran DNA dan RNA tetapi bukan protein. | Elektroforesis gel menegak digunakan untuk mengasingkan campuran protein. |
Ringkasan – Elektroforesis Gel Mendatar lwn Menegak
Elektroforesis gel ialah teknik makmal yang digunakan secara meluas dalam pengasingan campuran yang mengandungi molekul DNA, RNA, dan protein. Terdapat dua kaedah elektroforesis gel: elektroforesis gel mendatar dan menegak. Dalam elektroforesis gel mendatar, penimbal berjalan adalah berterusan manakala dalam elektroforesis gel menegak, ia tidak berterusan. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis gel mendatar dan menegak. Kedua-dua sistem berfungsi mengikut prinsip umum elektroforesis gel.
Muat turun Versi PDF Elektroforesis Gel Mendatar lwn Menegak
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Elektroforesis Gel Mendatar dan Menegak.
