Perbezaan Utama – Elektroforesis Kapilari lwn Elektroforesis Gel
Elektroforesis ialah teknik yang digunakan untuk mengasingkan biomolekul berdasarkan cas zarah, saiz zarah dan bentuk zarah. Penghijrahan molekul, yang dikenali sebagai mobiliti elektroforesis, bergantung kepada jenis polimer/gel yang digunakan, saiz liangnya, voltan yang disediakan, masa berjalan dan nisbah permukaan kepada isipadu. Terdapat pelbagai jenis teknik elektroforesis berdasarkan jenis biomolekul yang digunakan. Jenis elektroforesis pertama yang dicipta ialah elektroforesis kertas di mana kertas nitroselulosa digunakan sebagai medium untuk pengasingan biomolekul. Prinsip elektroforesis gel di mana gel bersaiz liang yang berbeza digunakan untuk memisahkan biomolekul, telah dicipta kemudian. Teknik elektroforesis gel telah diubahsuai lagi untuk meningkatkan ketepatan teknik, dan satu pengubahsuaian tersebut ialah elektroforesis kapilari. Perbezaan utama antara elektroforesis kapilari dan elektroforesis gel ialah elektroforesis gel dilakukan dalam satah menegak atau mendatar menggunakan gel polimer dengan saiz liang standard manakala elektroforesis kapilari dilakukan dalam tiub kapilari dengan cecair polimer atau gel.
Apakah Gel Elektroforesis?
Elektroforesis gel ialah teknik yang digunakan untuk mengasingkan terutamanya asid nukleik, protein atau asid amino berdasarkan cas, saiz dan bentuknya. Teknik ini menggunakan gel fizikal, iaitu bahan polimer, sebagai medium pengasingan. Gel yang paling biasa digunakan ialah Agarose (untuk pemisahan asid nukleik) dan Polyacrylamide (untuk pemisahan protein). Radas elektroforesis gel mengandungi dulang tuangan gel untuk menyediakan gel, sikat tuang untuk menyediakan telaga, tangki penampan, elektrod - positif (anod) dan negatif (katod) dan unit bekalan voltan. Molekul seperti DNA atau RNA, yang bercas negatif, bergerak dari katod ke anod dan molekul yang bercas positif bergerak sebaliknya. Penyediaan gel dilakukan mengikut keperluan. Jika resolusi tinggi atau pemisahan molekul diperlukan, gel berkepekatan tinggi dengan saiz liang yang lebih kecil perlu disediakan. Molekul yang diasingkan pada matriks gel diperhatikan selepas teknik pewarnaan. Molekul yang dipisahkan kelihatan sebagai jalur pada matriks gel.
Rajah 01: Gel Elektroforesis
Elektroforesis gel digunakan dalam diagnostik molekul seperti cap jari DNA untuk menentukan kehadiran serpihan DNA/RNA atau protein tertentu. Elektroforesis gel juga menentukan ketulenan sampel biomolekul yang diekstrak. Elektroforesis gel dilakukan sebagai langkah awal untuk masuk dan hibridisasi dan sebagai analisis pengesahan selepas penjujukan.
Apakah itu Elektroforesis Kapilari?
Elektroforesis kapilari ialah pengubahsuaian elektroforesis gel yang menggunakan prinsip pengasingan yang sama berdasarkan cas, saiz molekul, tetapi dilakukan dalam tiub kapilari dengan sama ada bahan gel atau polimer cecair. Kapilari disediakan daripada silika bercantum, dan setiap tiub kapilari mempunyai diameter dalaman 50-100μm dan panjangnya 25-100cm. Sampel disuntik ke dalam tiub kapilari yang mengandungi bahan polimer dan diasingkan dengan lebih cepat daripada elektroforesis gel konvensional. Sistem kapilari dilindungi dengan baik di dalam jaket penebat yang melindungi sampel daripada sebarang pencemaran. Kapilari boleh diisi dengan polimer cecair seperti selulosa hidroksietil atau gel resolusi tinggi seperti poliakrilamida. Elektroforesis kapilari memberikan resolusi yang lebih besar; maka pemisahan adalah lebih tepat. Elektroforesis kapilari menggunakan sistem pengesan automatik melalui analisis spektrofotometri. Ini disebabkan oleh nisbah luas permukaan kepada isipadu yang lebih tinggi.
Rajah 02: Elektroforesis Kapilari
Elektroforesis kapilari digunakan dalam situasi seperti dalam forensik di mana ketepatan yang lebih tinggi diperlukan dan tidak biasa digunakan kerana ia memerlukan teknik yang mahal.
Apakah Persamaan Antara Elektroforesis Kapilari dan Elektroforesis Gel?
- Pemisahan molekul dalam kedua-dua teknik adalah berdasarkan cas dan saiz molekul.
- Kedua-dua teknik boleh digunakan untuk memisahkan kedua-dua asid nukleik dan protein.
- Volume sampel kedua-dua teknik adalah sama.
- Kedua-dua teknik menggunakan penimbal untuk memudahkan pemisahan.
Apakah Perbezaan Antara Elektroforesis Kapilari dan Elektroforesis Gel?
Elektroforesis Kapilari lwn Elektroforesis Gel |
|
| Elektroforesis kapilari ialah teknik yang mengasingkan biomolekul pada tiub kapilari menggunakan medium polimer cecair atau gel. | Elektroforesis gel ialah teknik yang mengasingkan biomolekul pada satah menegak atau mendatar menggunakan medium gel polimer. |
| Perpisahan | |
| Dalam elektroforesis kapilari, pengasingan dilakukan di dalam tiub kapilari. | Dalam elektroforesis gel, pengasingan dilakukan pada satah menegak atau mendatar. |
| Medium Pemisahan | |
| Polimer cecair seperti hidroksietilselulosa digunakan dalam elektroforesis kapilari. | Gel, sama ada agarose atau polyacrylamide, digunakan sebagai medium dalam elektroforesis gel. |
| Pautan Silang | |
| Leraian tinggi boleh diperoleh daripada elektroforesis kapilari. | Resolusi rendah dalam elektroforesis gel. |
| Nisbah Luas Permukaan kepada Kelantangan | |
| Nisbah permukaan kepada isipadu adalah tinggi dalam elektroforesis kapilari. | Nisbah permukaan kepada isipadu adalah rendah dalam elektroforesis gel. |
| Teknik Pengesanan | |
| Pengesanan dilakukan melalui pengesan automatik spektrofotometri dalam elektroforesis kapilari. | Pewarnaan dan pemerhatian melalui transilluminator UV dilakukan sebagai teknik pengesanan dalam elektroforesis gel. |
Ringkasan – Elektroforesis Kapilari lwn Elektroforesis Gel
Diagnostik molekul memainkan peranan utama dalam dunia saintifik. Pengenalpastian dan penulenan DNA, RNA, dan Protein adalah langkah kritikal dalam prosedur diagnostik. Elektroforesis ialah teknik yang memisahkan dan mengenal pasti biomolekul dalam kedua-dua elektroforesis gel dan elektroforesis gel kapilari yang lebih maju. Elektroforesis gel dilakukan dalam satah menegak atau mendatar menggunakan gel polimer saiz liang standard manakala elektroforesis kapilari dilakukan dalam tiub kapilari dengan cecair polimer atau gel. Ini adalah perbezaan antara elektroforesis kapilari dan elektroforesis gel. Setelah selesai teknik elektroforesis, biomolekul diproses selanjutnya untuk mendapatkan maklumat tahap yang lebih tinggi melalui hibridisasi atau melalui teknik seperti cap jari.
Muat turun Versi PDF Elektroforesis Kapilari lwn Elektroforesis Gel
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Elektroforesis Gel dan Elektroforesis Kapilari.
