Perbezaan Utama – Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Diagnostik penyakit, yang menggunakan kaedah biologi molekul, telah menjadi bidang baru dalam teknologi makmal klinikal. Ia termasuk semua ujian dan kaedah untuk mengenal pasti penyakit dan memahami punca penyakit dengan menganalisis DNA, RNA atau protein yang dinyatakan dalam organisma. Kemajuan pesat dalam diagnostik molekul telah membolehkan penyelidikan asas mengenai penyakit berjangkit dan tidak berjangkit. Ini digunakan untuk menentukan perubahan dalam urutan atau tahap ekspresi dalam gen atau protein penting yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang digunakan secara meluas dalam biologi kanser. IF ialah sejenis IHC di mana kaedah pengesanan pendarfluor digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, manakala IHC menggunakan kaedah berasaskan kimia untuk mengesan antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini ialah perbezaan utama antara IF dan IHC.
Apakah itu Imunofluoresensi (JIKA)?
Imunofluoresensi ialah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabelkan menggunakan pewarna pendarfluor atau protein pendarfluor untuk tujuan pengesanan. Antibodi sekunder yang dilabelkan boleh mengakibatkan isyarat latar belakang yang tidak diingini; Oleh itu, teknik IF adalah berdasarkan pelabelan antibodi utama itu sendiri pada masa ini untuk mengelakkan isyarat yang tidak diingini semasa pengesanan. Melalui teknik ini, pengikatan tidak spesifik antara antibodi primer dan sekunder dihalang, dan ia lebih pantas kerana tiada langkah pengeraman sekunder yang terlibat. Kualiti data juga dipertingkatkan.
Rajah 01: Pewarnaan imunofluoresensi berganda untuk BrdU, NeuN dan GFAP
Fluorochromes atau pewarna pendarfluor ialah sebatian yang boleh menyerap sinaran, sebaik-baiknya sinaran ultra ungu yang teruja. Apabila zarah mencapai keadaan dasar dari keadaan teruja, ia mengeluarkan sinaran yang ditangkap dan dikesan oleh pengesan untuk membentuk spektrum. Adalah sangat penting bahawa label pendarfluor adalah serasi dan stabil untuk tindak balas tertentu dan ia harus dikonjugasikan dengan betul kepada antibodi untuk mendapatkan keputusan yang tepat. Salah satu fluorochrome yang paling banyak digunakan ialah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan penyerapan dan panjang gelombang puncak pelepasan masing-masing 490 nm dan 520 nm. Rhodamine, agen lain yang digunakan dalam IF, berwarna merah dan mempunyai penyerapan dan panjang gelombang puncak pelepasan yang berbeza 553 nm dan 627 nm.
Apakah itu Imunohistokimia (IHC)?
IHC ialah kaedah ujian molekul yang diamalkan untuk mengenal pasti dan mengesahkan kehadiran antigen dalam sel sasaran. Sel sasaran boleh menjadi zarah berjangkit, patogen mikrob atau sel tumor malignan. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan kehadiran antigen yang terdapat pada permukaan sel sel sasaran. Teknik ini berdasarkan pengikatan antigen-antibodi. Penanda pengesanan disambungkan kepada antibodi ini untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan antigen tertentu. Penanda ini boleh menjadi penanda kimia seperti enzim, antibodi bertag pendarfluor atau antibodi berlabel radio.
Rajah 02: Potongan otak tetikus diwarnai oleh Imunohistokimia
Aplikasi IHC yang paling popular adalah dalam biologi sel kanser untuk mengenal pasti kehadiran tumor malignan, tetapi ia juga digunakan untuk pengesanan penyakit berjangkit.
Apakah Persamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?
- Imunofluoresensi dan Imunohistokimia berlaku dalam keadaan in vitro.
- Kedua-dua teknik adalah berdasarkan antigen-antibodi
- Kedua-duanya adalah teknik yang sangat pantas.
- Hasil teknik boleh dihasilkan semula.
- Kedua-duanya telah meningkatkan kualiti data.
- Teknik ini digunakan dalam diagnostik untuk kanser dan penyakit berjangkit.
Apakah Perbezaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?
Imunofluoresensi vs Imunohistokimia |
|
| IF ialah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabel menggunakan pewarna pendarfluor atau protein pendarfluor untuk pengesanan. | IHC ialah teknik pengesanan di mana antibodi yang digunakan dalam ujian dilabel menggunakan bahan kimia atau unsur radioaktif untuk pengesanan. |
| Ketepatan | |
| Ketepatan lebih tinggi dalam teknik IF berbanding IHC. | Ketepatan lebih rendah dalam IHC. |
| Kekhususan | |
| JIKA lebih spesifik. | IHC kurang spesifik. |
Ringkasan – Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Mekanisme molekul telah membawa banyak perubahan dalam bidang perubatan, menimbulkan kaedah ujian molekul lanjutan yang telah membawa revolusi dalam bidang diagnostik. Ciptaan ini telah membawa kepada pengecaman dan pengesahan penyakit yang cepat dan tepat, dengan itu membolehkan pentadbiran dan pengeluaran ubat yang berjaya. Teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk mencari sasaran ubat dan untuk mengesahkan sifat farmakokinetik ubat semasa metabolisme dadah. IF dan IHC adalah dua kaedah diagnostik yang berdasarkan konsep pengikatan antigen dan antibodi, walaupun cara pengesanan dalam kedua-dua teknik berbeza. IF menggunakan prinsip pendarfluor untuk mengesan antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mengesan antigen. Ini ialah perbezaan antara IF dan IHC.
Muat turun Versi PDF Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia.
