Perbezaan Utama – Hibridisasi In Situ lwn Imunohistokimia
Diagnostik kanser dan penyakit berjangkit ialah trend popular di mana teknik berasaskan proteomik dan genomik baru digunakan untuk tujuan mengenal pasti tumor atau sel berjangkit, percambahannya dan tapak perkembangan sel serta menganalisis asas genetik yang paling mudah berjangkit dan penyakit tidak berjangkit. Ini akan menghasilkan pemprosesan dan reka bentuk ubat yang tepat dan dalam membangunkan terapi tersuai untuk penyakit. Hibridisasi in situ (ISH) dan Imunohistokimia (IHC) adalah dua teknik yang digunakan secara meluas dalam biologi kanser dan perbezaan utama antara hibridisasi in situ dan imunokimia terletak pada molekul yang digunakan dalam prosedur analisis. Dalam ISH, probe asid nukleik digunakan dalam analisis manakala, dalam IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk penentuan diagnostik.
Apakah itu In Situ Hybridization (ISH)?
Hibridisasi in situ ialah teknik hibridisasi asid nukleik yang dilakukan secara langsung pada bahagian atau bahagian tisu, dalam keseluruhan tisu atau dalam sel. Teknik ini bergantung pada teori pasangan asas pelengkap Watson Crick, menghasilkan sama ada kacukan DNA-DNA atau hibrid DNA-RNA yang boleh mengesan gen bermutasi atau mengenal pasti gen yang dikehendaki. Jujukan DNA untai tunggal, jujukan DNA untai berganda, jujukan RNA untai tunggal atau jujukan oligonukleotida sintetik digunakan sebagai probe semasa teknik hibridisasi, dan probe ini dilabelkan dengan fosforus radioaktif pada hujung 5' untuk prosedur pengecaman semasa autoradiografi atau dilabel menggunakan pewarna pendarfluor.. Terdapat pelbagai jenis teknik ISH yang tersedia berdasarkan jenis probe yang digunakan dan jenis teknik visualisasi yang diikuti.
Rajah 01: Hibridisasi Dalam Situ Pendarfluor
Terdapat banyak aplikasi ISH, terutamanya dalam diagnostik molekul penyakit berjangkit untuk mengenal pasti kehadiran patogen dan mengesahkan patogen melalui diagnostik molekul. Ia juga digunakan dalam bidang biologi perkembangan, karyotyping dan analisis filogenetik serta pemetaan fizikal kromosom.
Apakah itu Imunohistokimia (IHC)?
Dalam teknik IHC, molekul utama yang dianalisis ialah antigen. Semasa IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan kehadiran antigen apabila jangkitan atau status proliferasi sel malignan. Teknik ini berdasarkan pengikatan antigen-antibodi, dan label enzim digunakan untuk teknik ini; satu aplikasi sedemikian ialah ELISA (ujian imunosorben berkaitan enzim). Penanda juga boleh berupa antibodi bertag pendarfluor atau antibodi berlabel radio.
Rajah 02: Imunohistokimia
IHC digunakan secara meluas untuk pengesanan sel kanser. Prosedur diagnostik menyasarkan antigen yang terdapat pada sel tumor untuk mengenal pasti dan mencirikan tumor. Prosedur yang sama digunakan untuk mendiagnosis agen berjangkit. Antibodi monoklonal dan Poliklonal juga digunakan untuk menganalisis produk gen yang berbeza dengan membolehkan tindak balas pengikatan antibodi-antigen antara protein yang dikehendaki dan antibodi sintetik yang diberikan.
Apakah Persamaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?
- ISH dan IHC adalah tindak balas yang sangat spesifik.
- Kedua-dua teknik adalah sangat tepat.
- Kedua-dua teknik boleh digunakan dalam diagnostik untuk kanser dan penyakit berjangkit.
- Teknik ini dilakukan dalam persekitaran in-vitro steril.
- Kedua-duanya adalah teknik pantas yang memberikan hasil yang boleh dihasilkan.
- ISH dan IHC menggunakan kaedah pengesanan seperti pelabelan radio dan teknik pendarfluor.
Apakah Perbezaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?
Hibridisasi Dalam Situ lwn Imunohistokimia |
|
| ISH ialah teknik hibridisasi asid nukleik yang dilakukan secara langsung pada bahagian atau bahagian tisu atau keseluruhan tisu. | IHC ialah teknik di mana antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan kehadiran antigen, iaitu penanda protein khas yang diletakkan pada permukaan sel. |
| Jenis Bio Molekul Dianalisis | |
| ISH menganalisis asid nukleik. | IHC menganalisis protein-antigen. |
| Asas Tindak Balas Biokimia | |
| Gandingan asas pelengkap antara DNA-DNA atau DNA-RNA berlaku dalam teknik ini. | Interaksi antigen-antibodi terlibat dalam imunohistokimia. |
| Kaedah Pengesanan Berkaitan Enzim | |
| Kaedah pengesanan dipautkan enzim tidak boleh digunakan dalam ISH. | Kaedah pengesanan terpaut enzim boleh digunakan dalam IHC. |
Ringkasan – Hibridisasi In Situ lwn Imunohistokimia
Diagnostik molekul adalah kaedah cepat dan pengesahan yang boleh digunakan untuk mengenal pasti penyakit tidak berjangkit seperti kanser atau penyakit berjangkit seperti HIV atau Tuberkulosis berdasarkan penanda molekul yang terdapat pada sel yang membawa kepada manifestasi penyakit. Penanda molekul boleh hadir dalam bentuk protein yang dinyatakan atau pada peringkat genetik berdasarkan teknik novel yang berbeza diperkenalkan untuk meningkatkan kecekapan dan kurang menyusahkan, walaupun terdapat kos yang tinggi yang terlibat dengan teknik ini. Oleh itu ISH bergantung kepada pembentukan hibrid DNA-DNA atau DNA-RNA, dan IHC bergantung kepada tindak balas khusus antara antibodi dan antigen. Ini adalah perbezaan antara hibridisasi in situ.
Muat turun Versi PDF Hibridisasi Dalam Situ vs Imunohistokimia
Anda boleh memuat turun versi PDF artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan luar talian seperti dalam nota petikan. Sila muat turun versi PDF di sini Perbezaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia.
