Perbezaan Utama – Gel Elektroforesis vs Halaman SDS
Elektroforesis gel ialah teknik yang memisahkan makromolekul dalam medan elektrik. Ia adalah kaedah biasa dalam biologi Molekul untuk memisahkan DNA, RNA dan protein daripada campuran mengikut saiz molekulnya. Halaman SDS ialah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein daripada campuran protein berdasarkan saiznya. Elektroforesis gel ialah istilah yang digunakan untuk merujuk kepada teknik biasa yang digunakan untuk pemisahan DNA, RNA, dan protein manakala SDS Page ialah satu jenis elektroforesis gel. Ini adalah perbezaan utama antara elektroforesis gel dan Halaman SDS.
Apakah Gel Elektroforesis?
Elektroforesis gel ialah teknik biasa yang digunakan di makmal untuk mengasingkan molekul bercas seperti DNA, RNA, protein, dll. daripada campurannya. Gel digunakan dalam elektroforesis gel. Ia bertindak sebagai penapis molekul. Terdapat dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis gel iaitu agarose dan polyacrylamide. Pemilihan gel dan penyediaan gel adalah faktor penting yang perlu dipertimbangkan dalam elektroforesis gel kerana saiz liang gel harus dimanipulasi dengan teliti untuk pemisahan molekul yang baik melalui elektroforesis gel. Elektroforesis gel mempunyai medan elektrik yang disambungkan kepada dua hujung gel. Satu hujung gel menunjukkan cas positif manakala hujung yang satu lagi bercas negatif.
DNA dan RNA ialah molekul bercas negatif. Sebaik sahaja ia dimuatkan ke dalam gel dari hujung negatif gel dan digunakan pada medan elektrik, ia berhijrah melalui liang gel ke arah hujung gel yang bercas positif. Kelajuan migrasi bergantung pada cas dan saiz molekul. Molekul yang lebih kecil mudah berhijrah melalui liang gel daripada molekul yang lebih besar. Oleh itu, molekul yang lebih kecil bergerak dalam jarak yang jauh melalui gel dan molekul yang lebih besar bergerak dalam jarak yang dekat. Untuk memerhatikan perjalanan molekul pada gel, jenis pewarna khas digunakan. Medan elektrik digunakan untuk tempoh masa tertentu dan dihentikan untuk mengelakkan kehilangan molekul dan mengekalkan molekul pada kedudukan pengembaraannya. Band yang berbeza boleh diperhatikan dalam gel. Jalur ini mewakili molekul dengan saiz yang berbeza. Oleh itu, elektroforesis gel berguna untuk membezakan molekul mengikut saiznya.
Elektroforesis gel digabungkan ke dalam pelbagai teknik sebagai teknik persediaan dalam biologi Molekul seperti PCR, RFLP, pengklonan, penjujukan DNA, pembekuan selatan, pemetaan genom, dll.
Rajah 01: Elektroforesis gel agarose
Apakah Halaman SDS?
Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS Page) ialah sejenis elektroforesis gel yang digunakan untuk memisahkan protein. Apabila elektroforesis gel digunakan untuk memisahkan protein, rawatan khas diperlukan kerana protein tidak bercas negatif seperti DNA dan RNA dan tidak berhijrah ke hujung positif atau hujung negatif. Oleh itu, protein didenaturasi dan disalut dengan cas negatif sebelum elektroforesis gel. Ia dilakukan menggunakan detergen yang dipanggil sodium dodecyl sulfate (SDS). Elektroforesis gel yang menggunakan SDS dan gel poliakrilamida untuk medium sokongan dikenali sebagai Halaman SDS. Teknik ini biasanya digunakan dalam biokimia, genetik, forensik dan biologi molekul.
Semasa Halaman SDS, protein bercampur dengan SDS. SDS membuka lipatan protein ke dalam bentuk linear dan menyalutinya dengan cas negatif yang berkadar dengan jisim molekulnya. Disebabkan oleh cas negatif, molekul protein berhijrah ke arah hujung cas positif gel dan memisahkan mengikut jisim molekulnya. Dalam Halaman SDS, poliakrilamida digunakan sebagai sokongan padu untuk gel. Pemisahan sebenar protein bergantung terutamanya pada sifat gel. Oleh itu, penyediaan gel poliakrilamida perlu dilakukan dengan teliti dan kepekatan poliakrilamida yang betul harus digunakan. Gel poliakrilamida menunjukkan resolusi tinggi daripada gel agarose. Oleh itu, Halaman SDS dianggap sebagai teknik resolusi tinggi untuk pemisahan protein.
SDS Page ialah sejenis elektroforesis gel denaturasi. Ia mempunyai had utama dalam analisis protein. Memandangkan SDS mendenaturasi protein sebelum pemisahan, ia tidak membenarkan pengesanan aktiviti enzimatik, interaksi pengikat protein, kofaktor protein, dsb.
Rajah 02: Halaman SDS
Apakah perbezaan antara Gel Elektroforesis dan Halaman SDS?
Gel Electrophoresis vs SDS Page |
|
| Elektroforesis gel ialah kaedah yang dilakukan untuk mengasingkan makromolekul menggunakan medan elektrik. | SDS Page ialah teknik elektroforesis gel resolusi tinggi yang digunakan untuk mengasingkan protein berdasarkan jisimnya. |
| Larian Gel | |
| Ia boleh dilakukan secara mendatar atau menegak. | Halaman SDS sentiasa berjalan secara menegak. |
| Asas untuk Pemisahan | |
| Pemisahan berlaku mengikut caj dan saiz. | Pemisahan protein berlaku mengikut jisim dan cas. |
| Resolusi | |
| Elektroforesis gel agarosa mempunyai resolusi rendah dan elektroforesis gel poliakrilamida mempunyai resolusi yang lebih tinggi | Halaman SDS mempunyai peleraian yang lebih baik. |
| Denaturasi | |
| Elektroforesis gel termasuk kedua-dua teknik denaturasi dan tidak denaturasi. | Halaman SDS menyahtukarkan protein sebelum diasingkan. |
Ringkasan – Gel Elektroforesis lwn Halaman SDS
Elektroforesis gel ialah teknik biasa yang digunakan untuk pengasingan dan analisis DNA, RNA dan protein berdasarkan saiz dan casnya. Terdapat dua jenis elektroforesis gel yang utama iaitu elektroforesis gel agarose dan elektroforesis gel poliakrilamida. Gel agarose digunakan terutamanya untuk pemisahan asid nukleik; apabila resolusi yang lebih tinggi diperlukan, gel poliakrilamida digunakan. Halaman SDS ialah sejenis elektroforesis gel yang biasa digunakan untuk memisahkan campuran kompleks protein. Ia dianggap sebagai teknik pemisahan protein resolusi tinggi. Ini ialah perbezaan antara elektroforesis gel dan Halaman SDS.
