Perbezaan utama antara probe radioaktif dan bukan radioaktif ialah probe radioaktif ialah urutan DNA atau RNA untai tunggal yang dilabelkan dengan isotop radioaktif manakala probe bukan radioaktif ialah urutan DNA atau RNA untai tunggal yang dilabelkan dengan tag kimia atau teg pendarfluor.
Hibridisasi asid nukleik ialah teknik penting dalam biologi molekul, terutamanya dalam diagnosis mikrob. Ia membantu untuk mengenal pasti atau mengesan jujukan asid nukleik tertentu. Dalam teknik ini, asid nukleik diikat pada permukaan pepejal dan dihibridkan dengan probe. Probe ialah serpihan DNA atau RNA yang merupakan pelengkap kepada urutan kepentingan. Jika jujukan sasaran terdapat dalam sampel, siasatan akan berhibrid dengannya dan menjadikannya boleh dikesan. Terdapat dua jenis probe sebagai probe radioaktif dan bukan radioaktif. Oleh itu, kita boleh menandakan probe dengan tag radioaktif atau tag pendarfluor.
Apakah Probe Radioaktif?
Probe radioaktif ialah serpihan DNA atau RNA untai tunggal dengan tag radioaktif. Radioisotop digunakan dalam menyediakan probe radioaktif. Radioisotop 32P, 33P dan 35S biasanya digunakan dalam pelabelan probe. Selain itu, radioisotop 3H dan 1251 juga digunakan pada tahap yang lebih rendah dalam pelabelan probe. Tetapi ia digunakan untuk aplikasi tertentu. Antara radioisotop yang berbeza, 32P ialah isotop yang paling biasa digunakan dalam melabelkan probe radioaktif.
Probe radioaktif memberikan tahap kebolehpercayaan dan kekhususan yang lebih tinggi. Oleh itu, ia memberikan kepekaan maksimum dan membenarkan kuantiti yang tepat bagi jujukan sasaran. Walau bagaimanapun, terdapat beberapa kelemahan yang berkaitan dengan probe radioaktif. Mereka mempunyai separuh hayat yang pendek. Selain itu, ia berbahaya dan pengeluaran, penggunaan dan pelupusan bermasalah semasa pengendalian. Di samping itu, penyediaan probe radioaktif adalah proses yang mahal. Oleh itu, disebabkan oleh isu keselamatan dan kos, probe radioaktif tidak digunakan sebagai probe bukan radioaktif pada masa kini.
Apakah Prob Bukan Radioaktif?
Probe bukan radioaktif ialah jenis probe kedua yang dilabel secara kimia. Digoxigenin ialah probe bukan radioaktif, yang merupakan penanda berasaskan antibodi. Probe digoxigenin adalah khusus dan sensitif. Biotin ialah label lain yang digunakan dalam penyediaan probe bukan radioaktif. Sistem pengesanan Biotin/Streptavidin dan Digoxigenin/Antibodi ialah probe bukan radioaktif yang paling biasa digunakan dalam hibridisasi. Tambahan pula, sistem peroksidase lobak kuda adalah satu lagi sistem siasatan bukan radioaktif. Setelah probe bukan radioaktif ini dihibridkan dengan jujukan sasaran, ia boleh dikesan melalui autoradiografi atau teknik pengimejan lain.
Rajah 01: Hibridisasi dengan Prob Bukan Radioaktif
Probe bukan radioaktif digunakan lebih kerap dalam hibridisasi asid nukleik berbanding probe radioaktif. Ini kerana probe bukan radioaktif tidak dikaitkan dengan bahan berbahaya. Tambahan pula, kaedah pengesanan bukan radioaktif memerlukan masa pendedahan yang lebih pendek untuk mengesan isyarat hibridisasi. Walau bagaimanapun, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe bukan radioaktif biasanya membosankan dan memakan masa. Selain itu, penyelesaian yang tersedia secara komersial adalah mahal.
Apakah Persamaan Antara Prob Radioaktif dan Bukan Radioaktif?
- Probe radioaktif dan bukan radioaktif ialah dua jenis probe yang digunakan dalam hibridisasi asid nukleik.
- Ia memudahkan pengesanan jujukan sasaran dalam sampel.
- Kedua-dua jenis kuar adalah sama sensitif dan khusus.
Apakah Perbezaan Antara Prob Radioaktif dan Bukan Radioaktif?
Probe radioaktif ialah urutan DNA atau RNA untai tunggal yang dilabelkan dengan isotop radioaktif, manakala probe bukan radioaktif ialah urutan DNA atau RNA untai tunggal yang dilabelkan dengan tag kimia. Jadi, ini adalah perbezaan utama antara probe radioaktif dan bukan radioaktif. Juga, isotop radioaktif adalah berbahaya. Oleh itu, kuar radioaktif amat berbahaya, manakala kuar bukan radioaktif tidak berbahaya.
Selain itu, satu lagi perbezaan antara probe radioaktif dan bukan radioaktif ialah kelemahannya. Separuh hayat yang pendek dan bahaya yang berkaitan dengan pengeluaran, penggunaan dan pelupusannya adalah keburukan menggunakan probe radioaktif. Sebaliknya, langkah-langkah yang terlibat dalam hibridisasi DNA dengan probe bukan radioaktif biasanya membosankan dan memakan masa.
Di bawah maklumat grafik menunjukkan lebih banyak perbandingan yang berkaitan dengan perbezaan antara probe radioaktif dan bukan radioaktif.
Ringkasan – Siasatan Radioaktif lwn Nonradioaktif
Probe ialah serpihan DNA atau RNA yang mengandungi jujukan nukleotida yang merupakan pelengkap kepada jujukan yang menarik. Untuk mengesan jujukan sasaran, probe boleh dilabel secara radioaktif, pendarfluor atau kimia. Probe mengikat dengan urutan pelengkap dalam sampel. Kuar radioaktif dilabelkan dengan isotop radioaktif manakala kuar bukan radioaktif dilabelkan dengan biotin, digoxigenin atau lobak pedas peroksidase. Oleh itu, ini ialah perbezaan utama antara probe radioaktif dan bukan radioaktif.
