Perbezaan Utama – HPLC lwn LCMS
Mari kita lihat dahulu maksud HPLC dan LCMS sebelum menganalisis perbezaan antara HPLC dan LCMS. Kromatografi ialah teknik pemisahan dalam analisis kimia di mana juzuk sampel diasingkan semasa laluan melalui medium kromatografi. Ia juga melibatkan interaksi dengan sampel, fasa pegun dan fasa mudah alih. HPLC adalah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi, dan ia digunakan sebagai kaedah kromatografi cecair dalam kimia analitik. Gabungan Kromatografi Cecair dan Spektroskopi Jisim (LCMS) telah dibangunkan untuk analisis kuantitatif biomolekul terpilih dan ia merupakan prosedur ujian yang sangat sensitif, tepat dan spesifik berbanding HPLC. Ini adalah perbezaan utama antara HPLC dan LCMC. Artikel ini akan memperkenalkan anda kepada HPLC dan LCMC yang berurusan dengan analisis kimia dan membincangkan perbezaan antara HPLC dan LCMS.
Apakah itu HPLC?
Kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) ialah teknik pemisahan yang popular dalam kimia analitik. Ia digunakan terutamanya untuk mengasingkan komponen, untuk mengenal pasti dan untuk mengukur setiap komponen dalam campuran. Terdahulu, kaedah ini dikenali sebagai kromatografi cecair tekanan tinggi kerana ia bergantung kepada pam untuk mengalirkan pelarut cecair bertekanan yang terdiri daripada campuran sampel melalui lajur yang dibungkus dengan bahan penjerap pepejal. Setiap dan setiap juzuk dalam campuran sampel berinteraksi secara berbeza dengan bahan penjerap pepejal, yang menghasilkan kadar aliran yang berbeza untuk juzuk yang berbeza. Ini boleh menyebabkan pemisahan konstituen semasa ia mengalir keluar dari lajur HPLC.
HPLC telah digunakan untuk pelbagai aplikasi seperti analisis tahap vitamin D dalam darah, penggunaan dadah haram atlet dengan mengesan sisa ubat dalam air kencing mereka, menyusun konstituen sampel biologi kompleks untuk tujuan penyelidikan dan analisis dan pembuatan farmaseutikal.
Apakah itu LCMS?
Kromatografi cecair–spektrometri jisim (LCMS) ialah teknik analisis yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kebolehan analisis jisim spektrometri jisim (MS). Kromatografi cecair ialah teknik pemisahan, dan spektrometri jisim digunakan untuk menganalisis nisbah jisim-ke-cas bagi zarah bercas. Pemisahan fizikal biasanya dicapai oleh HPLC dan sebagai alternatif, LCMS juga dikenali sebagai HPLC-MS. LCMS ialah teknik analisis dominan yang mempunyai ketepatan, kepekaan, dan kekhususan yang sangat tinggi berbanding HPLC. Oleh itu, ia berguna dalam banyak aplikasi seperti tujuan penyelidikan, analisis ubat, analisis makanan, dan lain-lain. LCMS digunakan terutamanya untuk memisahkan, untuk mengesan, mengenal pasti dan mengukur sifat biokimia sampel tertentu dengan kehadiran campuran kimia yang kompleks.
Apakah perbezaan antara HPLC dan LCMC?
Akronim dan takrif HPLC dan LCMC
HPLC: HPLC adalah singkatan kepada Kromatografi Cecair Berprestasi Tinggi. Ia ialah teknik pengasingan yang digunakan terutamanya untuk mengasingkan komponen, mengenal pasti dan mengukur setiap komponen dalam campuran.
LCMS: LCMS ialah singkatan kepada Kromatografi Cecair dan Spektrometri Jisim. Ia ialah teknik analisis yang menggabungkan kebolehan pemisahan fizikal kromatografi cecair dengan kebolehan analisis jisim spektrometri jisim (MS).
Ciri HPLC dan LCMC
Klasifikasi
HPLC: Ini ialah kaedah Kromatografi Cecair sahaja.
LCMS: Ini ialah gabungan kaedah Kromatografi Cecair dan kaedah Spektrometri Jisim.
Kecekapan
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang cekap dan perlahan.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS adalah cekap dan lebih pantas.
Sensitiviti
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang sensitif.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS adalah lebih sensitif.
Kekhususan
HPLC: Berbanding dengan LCMS, analisis HPLC kurang spesifik.
LCMS: Berbanding dengan HPLC, analisis LCMS adalah lebih khusus.
Ketepatan
HPLC: HPLC memberikan hasil yang kurang tepat berbanding LCMS untuk penentuan beberapa bahan kimia.
LCMS: LCMS memberikan hasil yang lebih tepat daripada HPLC untuk penentuan beberapa bahan kimia.
Komponen
HPLC: HPLC boleh dianggap sebagai komponen LCMS.
LCMS: LCMS tidak boleh dianggap sebagai komponen HPLC.
Sumber Ion
HPLC: Sumber ion tidak wujud dalam instrumen HPLC.
LCMS: Sumber ion terdapat dalam instrumen LCMS.
Aplikasi
HPLC: Ion, polimer, molekul organik dan biomolekul boleh dianalisis menggunakan HPLC.
LCMS: Molekul organik dan biomolekul boleh dianalisis. Berbeza dengan HPLC, LCMS boleh digunakan untuk memeriksa campuran yang tidak diselesaikan sepenuhnya.
Operasi
HPLC: Gambar rajah instrumen HPLC diberikan dalam rajah 1, dan ia biasanya termasuk autosampler, pam dan pengesan. Pensampel memperkenalkan campuran sampel ke dalam fasa bergerak (campuran bertekanan pelarut seperti air, asetonitril dan/atau metanol) yang memindahkannya ke lajur. Pam menyampaikan aliran dan komposisi fasa mudah alih yang dikehendaki melalui lajur. Lajur diisi dengan penjerap, iaitu zarah pepejal berbutir seperti silika atau polimer. Pengesan menghasilkan isyarat yang berkadar dengan jumlah kehadiran juzuk sampel dalam lajur, oleh itu membenarkan analisis boleh diukur bagi juzuk sampel yang dipilih. Instrumen HPLC dikawal, dan analisis data disediakan oleh mikropemproses digital dan perisian pengguna.
Rajah 1: Gambar rajah instrumen HPLC
LCMS: Gambar rajah instrumen LCMS diberikan dalam rajah 2. Ekstrak sampel dimasukkan ke dalam lajur yang terdiri daripada HPLC. Lajur ini mengekalkan metabolit sampel berdasarkan watak fizikal, dan metabolit berbeza mengalir ke spektrometer jisim pada selang masa yang berbeza. Spektroskopi jisim digunakan untuk menilai jisim zarah, untuk menentukan susunan unsur molekul, dan untuk menjelaskan struktur molekul. Walau bagaimanapun, sampel harus diionkan untuk menghasilkan molekul bercas untuk menentukan nisbah jisim kepada casnya. Oleh itu, bukannya instrumen HPLC, LCMS terdiri daripada tiga modul tambahan seperti sumber besi, penganalisis jisim dan pengesan. Sumber ion boleh mengubah sampel fasa gas menjadi ion dan penganalisis jisim mengelompokkan ion mengikut jisimnya menggunakan medan elektromagnet. Akhir sekali, pengesan mengukur nilai dan menyampaikan data setiap ion yang terdapat dalam sampel. Teknik LCMS boleh digunakan untuk aplikasi kualitatif dan kuantitatif.
Rajah 2: Gambar rajah instrumen LCMS
Kesimpulannya, HPLC ialah kaedah kromatografi cecair manakala LCMS ialah gabungan kromatografi cecair dan spektrometri jisim. Kedua-dua teknik analisis ini mempunyai ciri yang berbeza, tetapi ia boleh digunakan untuk mengenal pasti dan mengukur komposisi makanan, farmaseutikal dan molekul bioaktif yang lain.
