Elektroforesis lwn Elektroosmosis
Kaedah pemisahan fizikal seperti penapisan, penyulingan, kromatografi lajur bukanlah kaedah yang mudah apabila melibatkan pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis ialah dua teknik pemisahan lain yang boleh digunakan untuk mengasingkan zarah bercas.
Apakah itu Elektroforesis?
Elektroforesis ialah teknik mengasingkan molekul berdasarkan saiznya. Asas untuk pemisahan ini ialah cas molekul dan keupayaannya untuk bergerak dalam medan elektrik. Ini adalah teknik yang paling biasa dan utama dalam biologi molekul untuk memisahkan molekul, terutamanya DNA dan protein. Ini kebanyakannya digunakan kerana ia agak mudah dan murah. Radas untuk elektroforesis boleh menjadi agak rumit, dan penyediaannya mengambil sedikit masa. Tetapi kita boleh dengan mudah membuat radas elektroforesis daripada perkara yang kita ada di makmal. Teknik elektroforesis boleh berbeza-beza bergantung pada tujuan kita. Kita boleh menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan apabila sampel yang lebih diselesaikan diperlukan (seperti dalam kes pencetakan jari). Gel digunakan sebagai medium sokongan untuk memisahkan molekul. Gel ini boleh disediakan sebagai kepingan rata atau dalam tiub. Asas prosedur ini adalah untuk memisahkan molekul bergantung pada kadar pergerakannya melalui gel apabila medan elektrik dibekalkan. Molekul bercas negatif seperti DNA cenderung bergerak ke arah kutub positif dalam medan elektrik ini manakala molekul bercas positif cenderung bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarose dan polyacrylamide. Kedua-duanya mempunyai kuasa penyelesaian yang berbeza. Gel bertindak sebagai penapis untuk menapis saiz molekul yang berbeza. Caj elektrostatik yang ditetapkan dalam gel bertindak sebagai daya.
Pemisahan bergantung pada mobiliti ion.
F=fv=ZeE
V=ZeE/ f
F=daya yang bertindak ke atas zarah
f=pekali geseran
V=purata halaju berhijrah
Z=cas zarah yang berhijrah
e=caj asas
E=kekuatan medan elektrik
Syarat yang diperlukan untuk elektroforesis adalah agak mudah. Apabila membuat gel dan menjalankan sampel, penimbal digunakan. Penanda dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apakah itu Elektro-osmosis?
Ini ialah proses menggerakkan cecair melalui bahan menggunakan medan elektrik yang digunakan. Pergerakan boleh melalui bahan berliang, sepanjang kapilari, membran dll. Ini boleh digunakan sebagai teknik pemisahan (terutamanya elektro-osmosis kapilari). Halaju cecair adalah berkadar linear dengan medan elektrik yang digunakan. Ia juga bergantung kepada bahan yang digunakan untuk membina saluran dan penyelesaian yang digunakan. Dalam antara muka, larutan dan bahan telah memperoleh cas yang bertentangan dan, ini dikenali sebagai lapisan dua elektrik. Apabila medan elektrik digunakan pada larutan, lapisan berkembar elektrik bergerak oleh daya Coulomb yang terhasil. Ini dikenali sebagai aliran elektro-osmotik.
Apakah perbezaan antara Elektroforesis dan Elektro-osmosis?
• Dalam elektroforesis, zarah pepejal (makromolekul seperti asid nukleik atau protein) digerakkan menggunakan medan elektrik. Tetapi dalam elektro-osmosis cecair sedang bergerak.
• Dalam elektroforesis, bahan pepejal sokongan adalah gel. Tetapi ia elektro-osmosis ia boleh menjadi gel, membran, kapilari, dll.
